[发明专利]幽门螺杆菌阴阳性与克拉霉素耐药性同步检测法在审
申请号: | 201910447440.4 | 申请日: | 2019-05-27 |
公开(公告)号: | CN110184331A | 公开(公告)日: | 2019-08-30 |
发明(设计)人: | 曾旭辉 | 申请(专利权)人: | 深圳前海大井医疗股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 深圳大域知识产权代理有限公司 44479 | 代理人: | 何园园 |
地址: | 518100 广东省深圳市前海深港合作区前*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开一种幽门螺杆菌阴阳性与克拉霉素耐药性同步检测法,其包括(1)向样品中加入第一溶液、于80‑100℃下处理2‑10分钟后,进行第一离心得到第一上清液,其中第一溶液包含1‑10重量%的十二烷基硫酸钠,且pH为5.4‑5.6;(2)向第一上清液中加入抑制剂清除剂混合均匀后,进行第二离心得到第二上清液;(3)向第二上清液中依次加入蛋白酶K和第二溶液并于60‑80℃下孵育5‑20分钟,然后加入无水乙醇混匀得到提取液,其中第二溶液包含30‑50重量%盐酸胍和0.1‑1重量%马来酸,且pH为5.8‑6.2;(4)使用离心柱从提取液中纯化得到核酸;(5)检测核酸中的野生型菌含量和突变型菌含量,由此判断样品中幽门螺旋杆菌的阴阳性以及在阳性情况下幽门螺旋杆菌的克拉霉素耐药性。 | ||
搜索关键词: | 上清液 耐药性 克拉霉素 阴阳性 幽门螺旋杆菌 同步检测法 幽门螺杆菌 提取液 核酸 十二烷基硫酸钠 无水乙醇 野生型菌 蛋白酶K 离心柱 马来酸 清除剂 突变型 盐酸胍 抑制剂 孵育 混匀 检测 | ||
【主权项】:
1.一种幽门螺杆菌阴阳性与克拉霉素耐药性同步检测法,其特征在于,包括:(1)向样品中加入第一溶液在80‑100℃下处理2‑10分钟后,进行第一离心得到第一上清液,其中所述第一溶液包含1‑10重量%的十二烷基硫酸钠,且pH为5.4‑5.6;(2)向所述第一上清液中加入抑制剂清除剂混合均匀后,进行第二离心得到第二上清液;(3)向所述第二上清液中依次加入蛋白酶K和第二溶液并于60‑80℃下孵育5‑20分钟,然后加入无水乙醇混匀得到提取液,其中所述第二溶液包含30‑50重量%盐酸胍和0.1‑1重量%马来酸,且pH为5.8‑6.2;(4)使用离心柱从所述提取液中纯化得到核酸;(5)检测核酸中的野生型菌含量和突变型菌含量,由此判断样品中幽门螺旋杆菌的阴阳性以及在阳性情况下幽门螺旋杆菌的克拉霉素耐药性。
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