[发明专利]一种利用三种糖基转移酶制备Globotriose-连接的活性糖肽的方法在审
| 申请号： | 201910441804.8 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN110117631A | 公开（公告）日： | 2019-08-13 |
| 发明（设计）人： | 陈敏;孔蕴;刘芳 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C12P21/02;C07K9/00 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用三种糖基转移酶分步合成法制备含有Globotriose‑连接活性糖肽的方法，首先是利用N‑糖基转移酶ApNGT将UDP‑Glc转移至含有N‑X(X≠P)‑T/S糖基化位点的多肽上的Asn氨基酸残基上，随后在β‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtB的作用下合成Peptide‑Lactose，然后在α‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtC的作用下合成产物，再使用高压液相色谱进行纯化，洗脱样品浓缩，产物冷冻干燥后即获得具有生物活性的Peptide‑globotriose活性糖肽。本发明方法为大量快速的生产多种基于Globotriose的寡糖肽提供了可能，具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 糖基转移酶 糖肽 半乳糖基 转移酶 制备 高压液相色谱 氨基酸残基 分步合成法 糖基化位点 合成产物 生物活性 洗脱样品 寡糖肽 再使用 多肽 合成 浓缩 应用 生产 | ||
【主权项】：
1.一种利用三种糖基转移酶分步合成法制备含有Globotriose‑连接活性糖肽的方法，步骤是：(1)以含有N‑X(X≠P)‑T/S的N‑糖基化位点的多肽为起始底物，利用N‑糖基转移酶ApNGT合成Peptide‑Glc活性糖肽；(2)以获得的Peptide‑Glc活性糖肽，利用β‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtB合成Peptide‑Glc‑Gal活性糖肽；(3)以获得的Peptide‑Glc‑Gal活性糖肽，利用α‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtC合成制得Peptide‑globotriose活性糖肽。
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