[发明专利]细胞培养基、试剂盒及细胞培养方法

摘要

本发明提供了一种细胞培养基，所述细胞培养基由基础培养基、营养源、通路抑制成分、抗氧化成分、糖皮质激素、激活成分和促分化成分组成。所述基础培养基为DMEM/12，所述通路抑制成分中的转化生长因子‑β信号抑制剂和γ‑分泌酶抑制剂用于促进肝向分化，再配合所述糖皮质激素、由腺苷酸环化酶激活剂组成的所述激活成分以及由FH1(BRD‑K4477)、FPH1(BRD‑6125)或FPH2(BRD‑9424)组成的促分化成分，共同取代现有技术中的二甲基亚砜来进一步促进肝前体细胞的成熟分化，避免了由于二甲基亚砜的毒性容易引起细胞凋亡的问题，且有利于缩短细胞成熟的时间。本发明还提供了包括所述细胞培养基的试剂盒，以及应用所述试剂盒进行的细胞培养方法。

主权项

1.一种细胞培养基，用于促进肝前体细胞的分化和成熟，其特征在于，所述细胞培养基由基础培养基、营养源、通路抑制成分、抗氧化成分、糖皮质激素、激活成分和促分化成分组成；所述基础培养基为DMEM/12培养基，所述营养源包括无血清细胞培养添加剂，所述通路抑制成分由转化生长因子‑β信号抑制剂和γ‑分泌酶抑制剂组成，所述激活成分为腺苷酸环化酶激活剂，以用于激活蛋白激酶A，所述抗氧化成分包括氮乙酰半胱氨酸，所述促分化成分为FH1(BRD‑K4477)、FPH1(BRD‑6125)或FPH2(BRD‑9424)；所述营养源的体积占所述基础培养基体积的1％‑2％；每1000克所述基础培养基中，所述通路抑制成分的质量为7×10^‑4克‑3×10^‑2克，所述抗氧化成分的质量为3.5×10^‑4克‑1.1克，所述糖皮质激素的质量为2.3×10^‑3克‑5.8×10^‑2克，所述激活成分的质量为8.2×10^‑4克‑2.1×10^‑2克，所述促分化成分的质量为1.1×10^‑3克‑0.15克。