[发明专利]一种获得高纯度重组人血清白蛋白的纯化方法在审
| 申请号： | 201910410018.1 | 申请日： | 2019-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN110092827A | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 齐乐;齐智;史杰 | 申请（专利权）人： | 齐智 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司： | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人： | 刘迪 |
| 地址： | 100054 北京市西*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种获得高纯度重组人血清白蛋白的纯化方法，该方法包括将发酵液进行离心和加热处理后依次进行初级超滤、二级超滤，随后使用30％的酒精和6mol/L的尿素将包裹在重组人血清白蛋白份子中的杂质去除，再进行蛋白复性、洗脱、透析，得到去杂液，最后将所得去杂液依次进行阳离子交换层析、阴离子交换层析、疏水层析，得到所述高纯度重组人血清白蛋白。通过此方法获得的重组人血清白蛋白具有纯度高、杂质少、不易降解、稳定性高等优势，具有良好的应用前景。最终获得基因重组人血清白蛋白的纯度达到了医药级(纯度大于99.999999％)的水平，完全符合美国药典和日本药典对注射剂级基因重组人血清白蛋白的要求。 | ||
| 搜索关键词： | 重组人血清白蛋白 高纯度 人血清白蛋白 基因重组 去杂 阳离子交换层析 阴离子交换层析 蛋白复性 二级超滤 加热处理 疏水层析 杂质去除 发酵液 医药级 注射剂 超滤 降解 透析 洗脱 尿素 酒精 应用 | ||
【主权项】：
1.一种获得高纯度重组人血清白蛋白的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将含有重组人血清白蛋白的发酵液进行离心处理，随后加入热稳定剂进行加热，得到重组人血清白蛋白上清液；(2)对重组人血清白蛋白上清液依次进行初级超滤、二级超滤，得到重组人血清白蛋白超滤液；(3)将重组人血清白蛋白超滤液加入到预先平衡好的Ni‑NTA层析柱中，依次使用去杂蛋白溶液、去杂液、平衡液对Ni‑NTA层析柱进行冲洗，随后使用蛋白洗脱液进行洗脱，使用透析液对洗脱下的蛋白进行透析，得到重组人血清白蛋白透析液；(4)对所述重组人血清白蛋白透析液依次进行阳离子交换层析、阴离子交换层析、疏水层析，得到所述高纯度重组人血清白蛋白。
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