[发明专利]一种短消毒时间的白掌茎尖组培快繁的方法

摘要

本发明公开了一种短消毒时间的白掌茎尖组培快繁的方法。所述的方法包括以下步骤：1)外植体选择及消毒；2)茎尖培养；3)丛生芽诱导；4)丛生芽增殖5)生根及移栽。本发明以带有1～2个叶原基、直径1～2mm的茎尖为外植体，能大幅度缩短0.1％升汞消毒时间，最大程度减少重金属对植株的伤害，消毒后茎尖全部成活，生长恢复快，降低由于重金属毒害所造成的变异风险。使用相对较低浓度的细胞分裂素(0.6～1mg/L 6‑BA)进行培养及增殖，获得较高的增殖倍数，并降低增殖过程中的变异概率，提高种苗质量。将生根植株进行移栽，成活率达99％以上。

主权项

1.一种短消毒时间的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体选择及消毒：于8～10月切取二年生白掌植株，取带4～5片叶柄的茎段，将茎段冲洗、晾干，以含氯消毒溶液进行清洁，用去离子水冲洗干净，无菌条件下剥去部分叶柄，加入HgCl₂溶液进行消毒，再用灭菌去离子水冲洗干净，吸干水分，剥取带有1～2个叶原基、直径为1～2mm的茎尖作为外植体；(2)茎尖培养：将茎尖置于1/2MS+0.2～0.6mg/L KT+0.1～0.5mg/L IBA+30g/L蔗糖+7.2g/L卡拉粉，pH 5.8～6.0的培养基中培养，获得无菌单芽；(3)丛生芽诱导：将无菌单芽转接到1/2MS+0.6mg/L 6‑BA+0.02mg/L NAA+30g/L蔗糖+7.2g/L卡拉粉，pH 5.8～6.0的培养基中培养，获得丛生芽；(4)丛生芽增殖：将丛生芽以双芽形式接种于3/4MS+0.6～1mg/L 6‑BA+0.05～0.1mg/L IBA+30g/L蔗糖+6.5g/L卡拉粉，pH 5.8～6.0的培养基中进行增殖培养；(5)生根及移栽：从增殖获得的丛生芽中切下带根单株，将带根单株置于1/2MS+0.5～1.0mg/L IBA+30g/L蔗糖+7.2g/L卡拉粉+0.2g/L活性炭，pH 5.8～6.0的培养基中进行生根培养，经炼苗后，移栽于填满泥炭基质的穴盘中进行栽培。