[发明专利]一种孕妇外周血胎儿DNA的富集方法在审
| 申请号： | 201910370618.X | 申请日： | 2019-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN110106230A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 葛芹玉;刘芝余;王欣怡;贾二腾 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 210096 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，本发明主要通过固定特异性抗体的磁性微球与孕妇血浆内的外泌体结合，捕获胎儿外泌体，从而从胎儿外泌体中提取DNA。本发明方法能从孕妇血浆/血清中分离胎儿外泌体，并且从中提取胎儿DNA，非常高效的获得极其微量的胎儿DNA，方法简单、实用、高效，也适用于多个样本的同时处理。 | ||
| 搜索关键词： | 胎儿DNA 孕妇血浆 外周血 富集 胎儿 孕妇 特异性抗体 磁性微球 分离胎儿 提取DNA 血清 捕获 样本 | ||
【主权项】：
1.一种孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述富集方法包括以下步骤：1）收集孕妇外周血，利用抗凝管储存，离心分离上层血浆；2）分离步骤1）的血浆中的外泌体；3）将洗好的抗体磁珠于离心管内，加入胎儿特异性抗体，温和倾斜并旋转孵育得到有特异性修饰的抗体磁珠；4）在步骤2）分离的血浆外泌体悬液中加入步骤3）包被有特异性修饰的抗体磁珠，混匀，旋转孵育30‑60min得到反应液；5）将步骤4）中的反应液用磁力架对磁珠进行吸附，吸弃反应液，然后用PBS缓冲液清洗一次，在磁力架吸附的状态下，吸弃上清；6）在步骤5）处理后的磁珠上加入洗脱液，脱离磁力架，混匀，室温放置，收集洗脱液即为胎儿外泌体溶液；7）提取胎儿外泌体溶液中的DNA即得。
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