[发明专利]一种孕妇外周血胎儿DNA的富集方法

权利要求书

1.一种孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述富集方法包括以下步骤：

1）收集孕妇外周血，利用抗凝管储存，离心分离上层血浆；

2）分离步骤1）的血浆中的外泌体；

3）将洗好的抗体磁珠于离心管内，加入胎儿特异性抗体，温和倾斜并旋转孵育得到有特异性修饰的抗体磁珠；

4）在步骤2）分离的血浆外泌体悬液中加入步骤3）包被有特异性修饰的抗体磁珠，混匀，旋转孵育30-60min得到反应液；

5）将步骤4）中的反应液用磁力架对磁珠进行吸附，吸弃反应液，然后用PBS缓冲液清洗一次，在磁力架吸附的状态下，吸弃上清；

6）在步骤5）处理后的磁珠上加入洗脱液，脱离磁力架，混匀，室温放置，收集洗脱液即为胎儿外泌体溶液；

7）提取胎儿外泌体溶液中的DNA即得。

2.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤3）中的抗体磁珠为标记有通用二抗的磁珠。

3.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤3）中胎儿特异性抗体为PLAP、HLA-G或CK-7中的一种。

4.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤3）中的胎儿特异性抗体和抗体磁珠的质量体积比为0.4~40：50μg/μL。

5.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤3）中的孵育时间为30~60min。

6.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤4）中血浆外泌体悬液与包被有特异性修饰的抗体磁珠的体积比40:1。

7.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤5）中吸附时间1~2h。

8.根据权利要求1所述的孕妇外周血胎儿DNA的富集方法，其特征在于，所述步骤6）中洗脱液与磁珠的体积比1:1。