[发明专利]一种用于PCR扩增的水稻胚芽米DNA模板获得方法及PCR方法在审
| 申请号： | 201910305392.5 | 申请日： | 2019-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN109897886A | 公开（公告）日： | 2019-06-18 |
| 发明（设计）人： | 汪秀峰;倪金龙;许学;马卉;王钰;焦小雨;叶洋洋;鲍翔宇;林玲;左泽平 | 申请（专利权）人： | 安徽省农业科学院水稻研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 俞晓明 |
| 地址： | 230001 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种用于PCR扩增的水稻胚芽米DNA模板获得方法及PCR方法，本发明应用碱处理水稻糙米直接作为PCR反应模板，其目的在于创立一种快速、有效、简便地进行植物DNA扩增的新方法，该方法是将水稻稻米样品去皮，于37℃光照下培养24个小时至露白，得到胚芽米，待用；取S1制得的胚芽米投入试剂A中，于95‑100℃下煮6‑10min，再加入等量的试剂B，搅拌均匀，获得胚芽米DNA模板，利用SSR标准引物，以所述DNA模板进行PCR扩增。本发明在进行种性验证及辅助田间育种时，具有时效性强、提取步骤简单、化学试剂较少、气味小以及环保的技术效果。 | ||
| 搜索关键词： | 胚芽米 水稻 生物技术领域 糙米 标准引物 化学试剂 技术效果 水稻稻米 田间育种 植物DNA 碱处理 时效性 等量 扩增 露白 去皮 光照 验证 环保 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于PCR扩增的水稻胚芽米DNA模板获得方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、材料处理将水稻稻米样品去皮，于37℃光照下培养至露白，得到胚芽米，待用；S2、试剂准备试剂A：浓度3.5‑4.5g/L的NaOH溶液；试剂B，且每500mL的试剂B配方如下：1mol/L pH8.0Tris‑HCl5ml，0.5mol/L EDTA 1ml，0.5mol/L HCl 100ml，加入蒸馏水定容至500ml；S3、胚芽米DNA模板的制备取S1制得的胚芽米投入试剂A中，于95‑100℃下煮6‑10min，再加入等量的试剂B，搅拌均匀，获得胚芽米DNA模板。
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