[发明专利]一测多评法评价小蓟质量的方法

摘要

本发明提供一种一测多评法评价小蓟质量的方法，首先建立小蓟中4种主要药效成分的HPLC含量测定方法，以芦丁作为内参物，计算其他3种活性成分的相对校正因子，并考察相对校正因子的系统适用性和方法重现性，根据相对保留时间进行色请峰定位，再结合相对校正因子算各待测成分的含量，通过一测多评法与外标法的相互验证，证明含量测定结果无显著差异。本发明方法克服了对照品成本高、不易得等难题，通过相对校正因子及色谱峰定位计算指标成分含量，实现小蓟中多种药效物质的同步测定，可节省成本、简化操作，提高效率，且检测灵敏度高，稳定性好，测定结果准确可靠，对小蓟质量控制和临床疗效的保证具有重大意义。

主权项

1.一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：步骤1、对照品标准溶液制备步骤1.1、分别取芦丁标准品、蒙花苷标准品以及木犀草素标准品和芹菜素标准品，用甲醇溶解后置于容量瓶、定容，即得芦丁标准溶液、蒙花苷标准溶液、木犀草素标准溶液以及芹菜素标准溶液；步骤1.2、分别取一定量的芦丁标准溶液、蒙花苷标准溶液、木犀草素标准溶液以及芹菜素标准溶液混合后置于容量瓶中，用甲醇定容，得到混合对照品溶液；步骤2、供试品溶液制备称取小蓟药材，置于索氏提取器中，加入石油醚，水浴加热脱脂至无色后晾干，将晾干后的小蓟药材再置于索氏提取器中，加入甲醇，水浴加热提取，将提取液置于容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到供试品溶液，备用；步骤3、高效液相色谱测定取步骤1.2中制备的混合对照品溶液和步骤2中制备的供试品溶液，进行色谱条件检测分析，得到混合对照品溶液的高效液相色谱图和供试品溶液的液相色谱图；其中，色谱条件如下：色谱柱：Agilent HC‑C18；柱温：25℃‑35℃；检测波长：260nm‑350nm；流动相：甲醇为流动相A，0.1％冰醋酸水为流动相B；梯度洗脱70min：步骤4、目标化合物的含量计算步骤4.1、利用混合对照品溶液的高效液相色谱图，计算各色谱峰的峰面积，以芦丁为内参物，根据相对校正因子计算公式分别计算蒙花苷、木犀草素和芹菜素的相对校正因子；其中，C_s为内参物质量浓度，A_s为内参物色谱峰面积，C_k为其它成分质量浓度，A_k为其他成分色谱峰面积；步骤4.2、对供试品溶液的高效液相色谱图中芦丁、蒙花苷、木犀草素和芹菜素相对保留时间进行峰定位，并结合步骤4.1中得到的蒙花苷、木犀草素和芹菜素的相对校正因子，计算供试品溶液中蒙花苷、木犀草素和芹菜素的含量。