[发明专利]一种sgRNA、敲除载体、KLF4基因的敲除方法及其应用有效
申请号: | 201910263714.4 | 申请日: | 2019-04-02 |
公开(公告)号: | CN110004145B | 公开(公告)日: | 2023-01-31 |
发明(设计)人: | 包文斌;王诗琴;戴开宇;王海飞;吴圣龙 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/90;C12N15/12;C12N15/11 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开一种sgRNA、双链DNA、载体和细胞。本发明还公开了一种KLF4基因的敲除方法。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术构建KLF4敲除的IPEC‑J2细胞系,可作为猪疾病研究的理想细胞模型;利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除,比基因沉默、干扰等技术手段可更有效地敲除KLF4基因,更有助于KLF4蛋白的功能研究;基因测序检测表明KLF4基因序列被敲除,可造成KLF4基因功能的缺失,是较为理想的KLF4基因敲除的IPEC‑J2细胞模型。本发明的敲除方法简便,打靶效率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 sgrna 载体 klf4 基因 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种sgRNA,其特征在于,所述sgRNA的碱基序列为 ACAGCCATGTCAGACTCGCC。
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