[发明专利]一种提高N端脑钠肽NT-proBNP稳定性的缓冲体系及制备方法

摘要

本发明提供一种提高心功能标记物N端脑钠肽NT‑proBNP稳定性的缓冲体系及制备方法，所述的NT‑proBNP重组蛋白与SUMO标签蛋白融合表达，并通过SUMO酶酶切去除，纯化获得无标签的NT‑proBNP重组蛋白，具有如SEQ.No.1所示的氨基酸序列，本发明所述的提高NT‑proBNP重组蛋白稳定性的缓冲体系为含有5%‑10%海藻糖，5%‑20%甘油，5%‑15%环糊精，3%‑8%山梨醇，pH为6.5~7.4的PBS缓冲液，可以使NT‑proBNP重组蛋白具有天然的NT‑proBNP蛋白的生物活性，可作为心衰诊断试剂标准品和抗体制备的优质可靠的原料，而且纯度高，成本低，稳定性高，具有较高商业化价值。

主权项

1.一种心功能标记物NT‑proBNP重组蛋白，其特征在于，制备步骤如下：步骤一、设计融合SUMO标签蛋白的NT‑proBNP重组蛋白；步骤二、培养大肠杆菌；步骤三、诱导表达，使步骤一设计的融合蛋白在大肠杆菌中表达，得到融合SUMO标签蛋白的NT‑proBNP重组蛋白；步骤四、分离纯化步骤三中表达的融合SUMO标签蛋白的NT‑proBNP重组蛋白；步骤五、用SUMO酶对步骤四得到的融合蛋白进行酶切，得到NT‑proBNP重组蛋白和SUMO标签蛋白混合蛋白；步骤六、步骤五得到的混合蛋白进行分离纯化，得到高纯度的NT‑proBNP重组蛋白，其氨基酸序列为SEQ.No.1。