[发明专利]一种阿魏酸酯酶及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910127543.2 | 申请日： | 2019-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN109652392B | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 辛志宏;南放;吴盛露;邱佳容;姜俊伟 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/18 | 分类号： | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;李晓峰 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种阿魏酸酯酶及其制备方法和应用，该来源于土壤宏基因文库的阿魏酸酯酶基因，其核苷酸序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。该基因含有极为罕见的四肽SXXK基序，将该酯酶基因插入到质粒pET28a(+)后，转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现异源表达。纯化后的重组酶(DLFae4)分子量为38.3kDa。此外，本发明首次提出新型阿魏酸酯酶可以水解氨苄青霉素、青霉素和头孢唑林等多种内酰胺类抗生素。定点诱变实验表明DLFae4的催化三联体由丝氨酸(S11)，组氨酸(H74)和天冬氨酸(D302)组成，三者中任何氨基酸的突变都会导致DLFae4失去催化能力。DLFae4对阿魏酸甲酯具有高水解活性，且具有良好的热稳定性。在纤维素酶的存在下，DLFae4可明显提高从去淀粉麦麸中释放阿魏酸的量。本发明的新型阿魏酸酯酶，由于其特有的活性及酶学特性，使其可应用于饲料、造纸、食品、制药等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 阿魏酸 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种阿魏酸酯酶DLFae4，其特征在于，该阿魏酸酯酶DLFae4的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
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