[发明专利]一种阿魏酸酯酶及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种阿魏酸酯酶DLFae4，其特征在于，该阿魏酸酯酶DLFae4的氨基酸序列如SEQ IDNo.2所示。

2.根据权利要求1所述的阿魏酸酯酶DLFae4，其特征在于，所述阿魏酸酯酶DLFae4含有一个四肽SXXK基序，催化三联体由丝氨酸（S11），组氨酸（H74）和天冬氨酸（D302）组成。

3.编码权利要求1所述阿魏酸酯酶DLFae4的基因dlfae4，其特征在于，该基因dlfae4的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

4.含有权利要求3所述的编码阿魏酸酯酶DLFae4的基因dlfae4的表达盒、重组载体、转基因细胞系和转基因重组菌。

5.一种重组阿魏酸酯酶DLFae4的制备方法，其特征在于，培养含有权利要求3所述的编码阿魏酸酯酶DLFae4的基因dlfae4的转基因重组菌，经IPTG诱导，从培养物中分离纯化得到所述重组阿魏酸酯酶DLFae4。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，含有权利要求3所述的编码阿魏酸酯酶DLFae4的基因dlfae4的转基因重组菌的构建方法为：

利用特异性引物fae-F/NcoI: 5’-CATGCCATGGATGACGATGGATACG-3’（SEQ ID No.3）和fae-R/XhoI 5’-CCGCTCGAGTACACTCGCATACACC-3’（SEQ ID No.4）

扩增权利要求3所述的阿魏酸酯酶基因dlfae4，以筛选的阳性克隆子质粒为模板进行PCR扩增，产物经NcoI和XhoI双酶切，与相同酶切线性化的表达载体pET-28a（+）连接，构建得到重组表达载体pET-dlfae4；将重组表达载体pET-dlfae4转化至宿主菌种大肠杆菌BL21（DE3），筛选阳性转化子即为含有编码阿魏酸酯酶DLFae4的基因dlfae4的转基因重组菌。

7.权利要求1所述的阿魏酸酯酶DLFae4在降解内酰胺底物或/和植物木质纤维素中的应用。

8.权利要求1所述的阿魏酸酯酶DLFae4在食品工业、制药工业、造纸工业和饲料工业中的应用。