[发明专利]一种适合中试量产的高纯度牛血清白蛋白纯化工艺有效
| 申请号： | 201910124694.2 | 申请日： | 2019-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN109776673B | 公开（公告）日： | 2022-03-29 |
| 发明（设计）人： | 孙永跃;何程铖 | 申请（专利权）人： | 天津理工大学;天津泰德合众生物科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K1/18 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 赵瑶瑶 |
| 地址： | 300384 天津市西青*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种适合中试量产的高纯度牛血清白蛋白提纯方法，旨在解决现有牛血清白蛋白生产工艺较复杂且产品纯度不高的技术难题。本发明建立了一步色谱层析技术，建立了从购买的低纯度牛血清白蛋白原料经过阴离子交换层析、超滤凝缩、冷冻干燥得到纯度为99.5％的产品。本发明工艺步骤少，流程短,操作简单,利于工业化生产且产品纯度高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适合 量产 纯度 血清 白蛋白 纯化 工艺 | ||
【主权项】：
1.一种适合中试量产的高纯度牛血清白蛋白纯化工艺，其特征在于：包括以下步骤：(1)上样样品的制备称取5～10g牛血清白蛋白原料，溶于800～100ml 20～50mM NaAc+HAc中，调至pH4～9；(2)缓冲液的配制：配制3～4L平衡缓冲液A:10～20mMNaAc+HA 2～4L洗脱缓冲液B:20～30mMNaAc+HAc 5～10L洗脱缓冲液C：3～10MNaCl 2～4L；(3)平衡与上样：在层析柱内装入填料，装好层析柱后用平衡液A平衡，流速为2～45ml/min，平衡约3～9个柱体积后，开始上样。继续用A液淋洗，淋洗至检测线平缓；(4)洗脱：用B液进行洗脱，收集洗脱峰并确定目标峰。紫外吸收降低至基线之后停止收峰，改用C液清洗柱子。最后用去离子水冲洗柱子，在将柱子保存在乙醇中。(5)置换与浓缩：用20～80kD 100～300cm2膜包将收集到的蛋白溶液进行浓缩与置换。(6)冷冻干燥为晶体状干粉。
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