[发明专利]一种小型鱼类DNA无损伤提取方法及DNA提取液在审
| 申请号： | 201910063438.7 | 申请日： | 2019-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN109486810A | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 封琦;唐晟凯;韩晓磊;顾伟;于正兴;陈建宁;王建国;王权 | 申请（专利权）人： | 江苏农牧科技职业学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 张阳 |
| 地址： | 225300*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开一种小型鱼类DNA无损伤提取方法及DNA提取液，该提取方法包括：1）用棉签从鱼体一侧的腮盖后缘向尾部刮取鱼体表粘液；2）将棉签浸没于DNA提取液中，涡旋、静置；3）将棉签拧干，加入异丙醇，混匀后‑80℃过夜处理或以液氮处理10min；4）样品自然解冻，离心，弃上清，加入乙醇，再次离心，取沉淀干燥，即提取获得基因组DNA；所述DNA提取液包括：20mL 1M Tris、5mL 0.5M EDTA、12.5mL 2M NaCl、57.5mL ddH2O、5mL质量分数为10%的SDS；本发明可应用于小型鱼类DNA的无损伤提取，操作简便，检测准确性高，对鱼类产生的应激反应低，宜于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 小型鱼类 无损伤 棉签 后缘 基因组DNA 沉淀干燥 体表粘液 样品自然 液氮处理 应激反应 质量分数 异丙醇 浸没 乙醇 刮取 混匀 拧干 涡旋 鱼体 解冻 鱼类 检测 应用 | ||
【主权项】：
1.一种小型鱼类DNA无损伤提取方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）取棉签沿鱼体的侧面刮取粘液；（2）将步骤（1）获得的棉签浸没于装有DNA提取液的离心管中，涡旋10‑15s, 室温静置15min;（3）将棉签在管壁上拧干，加入‑20℃预冷后的异丙醇，手动混匀3‑5次，然后将该样品置于‑80℃温度下中过夜或以液氮处理10min；（4）取出样品自然解冻，13000g/min离心10min；弃上清，加入质量分数为70%的乙醇，13000g/min离心2min；取沉淀自然干燥，即获得小型鱼类体表粘液基因组DNA；所述DNA提取液包括：20mL 1M Tris、5mL 0.5M EDTA、12.5mL 2M NaCl、57.5mL ddH2O、5mL质量分数为10%的SDS。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏农牧科技职业学院，未经江苏农牧科技职业学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910063438.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
