[发明专利]一种小型鱼类DNA无损伤提取方法及DNA提取液

权利要求书

1.一种小型鱼类DNA无损伤提取方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）取棉签沿鱼体的侧面刮取粘液；

（2）将步骤（1）获得的棉签浸没于装有DNA提取液的离心管中，涡旋10-15s, 室温静置15min;

（3）将棉签在管壁上拧干，加入-20℃预冷后的异丙醇，手动混匀3-5次，然后将该样品置于-80℃温度下中过夜或以液氮处理10min；

（4）取出样品自然解冻，13000g/min离心10min；弃上清，加入质量分数为70%的乙醇，13000g/min离心2min；取沉淀自然干燥，即获得小型鱼类体表粘液基因组DNA；

所述DNA提取液包括：20mL 1M Tris、5mL 0.5M EDTA、12.5mL 2M NaCl、57.5mL ddH₂O、5mL质量分数为10%的SDS。

2.根据权利要求1所述小型鱼类DNA无损伤提取方法，其特征在于，步骤1）所述取棉签沿鱼体的侧面刮取粘液是指：从鱼体一侧的腮盖后缘向尾部刮取5-10次，然后将鱼翻转，采用相同方法对鱼体的另一侧刮取粘液。

3.根据权利要求1或2所述小型鱼类DNA无损伤提取方法，其特征在于，所述小型鱼类包括鳑鲏、泰国斗鱼、草金鱼、孔雀鱼、曼龙、斑马鱼、稀有鮈鲫、麦穗鱼中的至少一种。

4.一种DNA提取液，其配比如下：20mL 1M Tris、5mL 0.5M EDTA、12.5mL 2M NaCl、57.5mL ddH₂O、5mL质量分数为10%的SDS。