[发明专利]基于FRET的端粒酶活性检测方法有效
| 申请号： | 201910006456.1 | 申请日： | 2019-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN109897887B | 公开（公告）日： | 2023-03-14 |
| 发明（设计）人： | 缪鹏;孟凡渝;陈锡峰;马筱一;梅茜 | 申请（专利权）人： | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6818 | 分类号： | C12Q1/6818;C12Q1/48 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人： | 韩飞 |
| 地址： | 215163 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于FRET的端粒酶活性检测方法，包括以下步骤：首先设计荧光修饰的Flare DNA；再利用四个单链DNA:S1、S2、S3、S4，构建出DNA四面体结构；然后将DNA四面体与Flare DNA进行杂交，获得荧光DNA纳米探针；再将荧光DNA纳米探针与端粒酶混合反应，获取混合物的荧光光谱。本发明设计的基于FRET的荧光探针，可提供精确的检测结果，避免了假阳性信号的产生并使生物成像中系统波动的影响最小化。另一方面，三维(3D)DNA纳米结构具有优异的生物相容性和纳米级可控性，可以通过快速内吞途径进入细胞内，并保持细胞基本的完整性和稳定性，经过合理组装后可应用于生物传感和生物成像。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 fret 端粒 活性 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于FRET的端粒酶活性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：首先设计两端分别修饰Cy3和Cy5荧光团的单链Flare DNA；再利用四个单链DNA:S1、S2、S3、S4，构建出DNA四面体结构，其中，S4链在其3'末端含有引物区段，用于端粒酶催化的延伸，S1被设计成具有两个Flare互补区域，其在DNA四面体的形成期间保持未杂交；然后将DNA四面体与Flare DNA进行杂交，获得荧光DNA纳米探针；再将荧光DNA纳米探针与端粒酶混合反应，获取混合物的荧光光谱，并对荧光光谱进行分析处理，实现对端粒酶活性的测定。
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