[发明专利]逆转录病毒的生产方法在审
申请号: | 201910003911.2 | 申请日: | 2019-01-03 |
公开(公告)号: | CN109735507A | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 范洁;苏财忠;童涌 | 申请(专利权)人: | 苏州药明康德检测检验有限责任公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00 |
代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 郑权 |
地址: | 215104 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开一种逆转录病毒生产方法,是采用鼠源细胞培养病毒,鼠源细胞的培养基的血清浓度在培养期间通过逐步递减,用含较低浓度血清的培养基更换逐步更换高浓度血清的培养基;每天收获病毒培养上清,并每天补充低浓度血清的培养基;收获的培养上清经低速离心后,直接采用高速离心获得病毒沉淀,重悬病毒沉淀,分装获得高浓度的病毒。本发明的方法,收获的病毒原液中宿主细胞成分含量低,血清成分含量低,且病毒培养的第一代结束后,将感染了病毒的细胞与未感染病毒的细胞混合,并传至新的培养瓶中,进行持续性的感染培养,不经细胞冻存复苏,培养周期快,每代可连续收获多次血清浓度低的病毒液,耗时短。 | ||
搜索关键词: | 病毒 血清 培养基 收获 低浓度血清 逆转录病毒 病毒培养 细胞 鼠源 感染 沉淀 细胞培养 培养基更换 病毒原液 低速离心 高速离心 培养周期 宿主细胞 细胞冻存 病毒液 持续性 培养瓶 分装 重悬 递减 耗时 复苏 生产 补充 | ||
【主权项】:
1.一种逆转录病毒生产方法,其特征在于,包括步骤:(1)采用鼠源细胞培养病毒,鼠源细胞的培养基的血清浓度有个递减的过程;(2)培养早期用较高浓度的血清,待细胞生长好后,逐步用含较低浓度血清的培养基更换含较高浓度血清的培养基,至少更换两次,待血清浓度低至2%时,每天收获病毒培养上清;(3)收获的培养上清经低速离心后收集上清,再采用高速离心获得病毒沉淀;重悬病毒沉淀,分装获得高浓度的病毒。
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