[发明专利]逆转录病毒的生产方法在审

专利信息
申请号: 201910003911.2 申请日: 2019-01-03
公开(公告)号: CN109735507A 公开(公告)日: 2019-05-10
发明(设计)人: 范洁;苏财忠;童涌 申请(专利权)人: 苏州药明康德检测检验有限责任公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00
代理公司: 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 代理人: 郑权
地址: 215104 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开一种逆转录病毒生产方法,是采用鼠源细胞培养病毒,鼠源细胞的培养基的血清浓度在培养期间通过逐步递减,用含较低浓度血清的培养基更换逐步更换高浓度血清的培养基;每天收获病毒培养上清,并每天补充低浓度血清的培养基;收获的培养上清经低速离心后,直接采用高速离心获得病毒沉淀,重悬病毒沉淀,分装获得高浓度的病毒。本发明的方法,收获的病毒原液中宿主细胞成分含量低,血清成分含量低,且病毒培养的第一代结束后,将感染了病毒的细胞与未感染病毒的细胞混合,并传至新的培养瓶中,进行持续性的感染培养,不经细胞冻存复苏,培养周期快,每代可连续收获多次血清浓度低的病毒液,耗时短。
搜索关键词: 病毒 血清 培养基 收获 低浓度血清 逆转录病毒 病毒培养 细胞 鼠源 感染 沉淀 细胞培养 培养基更换 病毒原液 低速离心 高速离心 培养周期 宿主细胞 细胞冻存 病毒液 持续性 培养瓶 分装 重悬 递减 耗时 复苏 生产 补充
【主权项】:
1.一种逆转录病毒生产方法,其特征在于,包括步骤:(1)采用鼠源细胞培养病毒,鼠源细胞的培养基的血清浓度有个递减的过程;(2)培养早期用较高浓度的血清,待细胞生长好后,逐步用含较低浓度血清的培养基更换含较高浓度血清的培养基,至少更换两次,待血清浓度低至2%时,每天收获病毒培养上清;(3)收获的培养上清经低速离心后收集上清,再采用高速离心获得病毒沉淀;重悬病毒沉淀,分装获得高浓度的病毒。
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