[发明专利]被检样品中的细菌数的定量方法在审
申请号: | 201880080998.7 | 申请日: | 2018-06-21 |
公开(公告)号: | CN111684067A | 公开(公告)日: | 2020-09-18 |
发明(设计)人: | 仁井见英树;北岛勋;宫腰晃央;东祥嗣 | 申请(专利权)人: | 三井化学株式会社;国立大学法人富山大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12Q1/689 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 杨宏军 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明的课题在于提供能够使用PCR法迅速且精度良好地定量被检样品中的细菌菌数的方法。作为解决上述课题的方法,利用以下的工序进行被检样品中的细菌的鉴定及定量。(1)第一PCR工序,以来源于被检样品的核酸作为模板,使用用于扩增细菌的16S rRNA基因的通用引物对,利用PCR法得到第一扩增产物;(2)第二PCR工序,使用用于扩增利用前述第一PCR工序得到的第一扩增产物所具有的序列的内部序列的引物对,利用巢式PCR法得到第二扩增产物;以及(3)菌数定量工序,使用校准用的数据,从由前述第二PCR工序得到的第二扩增产物的量求出前述被检样品中的细菌数。另外,也可以在上述的工序(1)~(3)的基础上追加以下的工序(4)及(5)。(4)菌种鉴定工序,对前述被检样品中的细菌的菌种进行鉴定。(5)细菌数校正工序,以由前述菌数定量工序求出的细菌数作为暂定细菌数,基于前述对照细菌及由前述菌种鉴定工序鉴定出的菌种的16S rRNA操纵子拷贝数来校正暂定细菌数,从而确定前述被检样品中的细菌数。 | ||
搜索关键词: | 样品 中的 细菌 定量 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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