[发明专利]一种去氢表雄酮的制备方法及其制备用酶在审
| 申请号： | 201880001977.1 | 申请日： | 2018-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN109312382A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 傅荣昭;刘立辉;陈小春;曹磊;刘滔滔 | 申请（专利权）人： | 邦泰生物工程(深圳)有限公司 |
| 主分类号： | C12P33/06 | 分类号： | C12P33/06;C12P7/02;C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;熊永强 |
| 地址： | 518102 广东省深圳市宝安区西乡*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种去氢表雄酮的制备方法，包括：在保护气氛下，向叔丁醇中加入叔丁醇钾，搅拌均匀后加入4‑雄烯二酮得到混合料，将所述混合料滴加至含有抗坏血酸钠的乙酸溶液中反应得到5‑雄烯二酮；将所述5‑雄烯二酮溶于有机溶剂中，并添加酮还原酶、葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和氧化还原辅酶得到混合液，控制所述混合液的pH为6.0‑6.3，于22‑26℃下搅拌反应1‑6小时后得到反应液，将所述反应液分离提纯后得到去氢表雄酮，所述酮还原酶和所述葡萄糖脱氢酶由微生物菌株共表达产生并以粗酶液形式添加。该制备方法合成工艺步骤少，操作简单，产率高，成本低，可以广泛适用于工业化规模生产。本发明还提供了一种制备用酶。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 去氢表雄酮 雄烯二酮 葡萄糖脱氢酶 酮还原酶 混合料 混合液 合成工艺步骤 葡萄糖 工业化规模 抗坏血酸钠 微生物菌株 分离提纯 搅拌反应 叔丁醇钾 氧化还原 乙酸溶液 有机溶剂 粗酶液 共表达 叔丁醇 产率 滴加 辅酶 生产 | ||
【主权项】：
1.一种去氢表雄酮的制备方法，其特征在于，包括：(1)在保护气氛下，向叔丁醇中加入叔丁醇钾，搅拌均匀后加入4‑雄烯二酮得到混合料，将所述混合料滴加至含有抗坏血酸钠的乙酸溶液中反应得到5‑雄烯二酮；(2)将步骤(1)中所述5‑雄烯二酮溶于有机溶剂中，并添加酮还原酶、葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和氧化还原辅酶得到混合液，控制所述混合液的pH为6.0‑6.3，于22‑26℃下搅拌反应1‑6小时，得到反应液，将所述反应液分离提纯后得到去氢表雄酮，所述酮还原酶和所述葡萄糖脱氢酶由微生物菌株共表达产生并以粗酶液形式添加，所述酮还原酶的来源于领地伯克霍尔德菌属、红球菌属和鞘氨醇单胞菌属中的一种或多种。
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