[发明专利]一种采用快速免疫磁珠法分离脑脊液中不同细胞来源外泌体亚型的方法在审
| 申请号： | 201811635494.5 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109913417A | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 董强;崔梅;国敏;陈兴栋;赵鸿琛;丁梦媛 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属华山医院 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 林君如 |
| 地址： | 200040 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种采用快速免疫磁珠法分离脑脊液中不同细胞来源外泌体亚型的方法，具体步骤包括：(1)对脑脊液进行预处理；(2)加入PE标记的一抗进行分选；(3)加入免疫磁珠；(4)增加磁场，进行分离。与现有技术相比，本发明精准分离中枢神经系统不同细胞来源的外泌体亚群，可供针对性的对中枢疾病以及不同靶细胞外泌体深入研究。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞来源 脑脊液 免疫磁珠法 亚型 预处理 中枢神经系统 免疫磁珠 靶细胞 分选 亚群 一抗 磁场 中枢 疾病 研究 | ||
【主权项】：
1.一种采用快速免疫磁珠法分离脑脊液中不同细胞来源外泌体亚型的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将脑脊液离心分离，取上清加入外泌体沉降抽提试剂后，混匀，孵育过夜，离心去掉上清液后，重悬，得到脑脊液样本；(2)在步骤(1)得到的脑脊液样本中加入PE标记的一抗，孵育后，加入外泌体分选试剂，混匀孵育，得到脑脊液标记样本；(3)将PE包被的磁珠震荡混匀，加入步骤(2)得到的脑脊液标记样本，混匀后孵育，得到混合样本；(4)将混合样本洗涤、吹打、置于磁场中，翻转后弃掉上清液；(5)将步骤(4)得到的沉淀洗涤，加入外泌体解离液，混匀孵育，然后洗涤、吹打、置于磁场中，翻转后收集上清液，即为特定来源的外泌体。
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