[发明专利]小鼠脑中神经细胞的提取分离方法在审
申请号: | 201811580964.2 | 申请日: | 2018-12-24 |
公开(公告)号: | CN109609457A | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
发明(设计)人: | 张媛;冶泽青;李星;杨婷 | 申请(专利权)人: | 陕西师范大学 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079 |
代理公司: | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人: | 李郑建 |
地址: | 710062 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种小鼠脑中神经细胞的提取分离方法,将离体小鼠脑部用酒精消毒后置于预冷无菌平衡盐溶液D‑hanks中;用手术刀将脑切碎,用0.15%(m/v)的木瓜蛋白酶液消化后,用含脱氧核糖核酸酶I的D‑hanks缓冲盐溶液吹打细胞后,过100μm滤网;然后用细胞分离液percoll差速离心去除髓鞘蛋白,得到单细胞悬液;用红细胞裂解液去除其中血红细胞;利用美天旎miltenyi的磁珠beads纯化得到各种类型的神经细胞。 | ||
搜索关键词: | 神经细胞 小鼠 提取分离 去除 脱氧核糖核酸酶I 红细胞裂解液 木瓜蛋白酶液 单细胞悬液 缓冲盐溶液 平衡盐溶液 细胞分离液 手术刀 差速离心 酒精消毒 髓鞘蛋白 血红细胞 吹打 磁珠 离体 滤网 脑部 切碎 无菌 预冷 细胞 消化 | ||
【主权项】:
1.一种小鼠脑中神经细胞的提取分离方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)将离体小鼠脑部用酒精消毒后置于预冷无菌平衡盐溶液D‑hanks中;(b)用手术刀将脑切碎,用0.15%(m/v)的木瓜蛋白酶液消化后,用含脱氧核糖核酸酶I的D‑hanks缓冲盐溶液吹打细胞后,过100μm滤网;(c)用细胞分离液percoll差速离心去除髓鞘蛋白,得到单细胞悬液;(d)用红细胞裂解液去除其中血红细胞;(e)利用美天旎miltenyi的磁珠beads纯化得到各种类型的神经细胞。
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