[发明专利]黄曲霉毒素产量与Nor-1基因转录量的同步检测RT-PCR试剂盒及其检测方法

摘要

本发明属于生物领域，具体涉及一种黄曲霉毒素产量与Nor‑1基因转录量的同步检测RT‑PCR试剂盒及其检测方法。本发明建立了同步检测黄曲霉菌株产毒量和nor‑1基因转录量的同步RT‑PCR检测方法，利用所述方法检测所得黄曲霉菌株产毒量、nor‑1基因转录量与采用HPLC定量黄曲霉毒素、Nanodrop定量Nor‑1基因转录量的结果存在良好的线性关系，因此，基于同步检测RT‑PCR方法获得的AFT/Nor‑1的比值结果可靠、准确，可以作为判定黄曲霉菌株产毒力高低的鉴定指标，实现了对黄曲霉菌株产毒力的快速、准确的鉴定评价，对黄曲霉毒素污染预警与防控具有重要意义。

主权项

1.一种黄曲霉毒素产量与Nor‑1基因转录量同步检测RT‑PCR试剂盒，其特征在于，包括：1)用于扩增表面展示黄曲霉毒素抗独特型纳米抗体的噬菌体所释放DNA片段的引物和探针：上游引物Ph‑F，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物Ph‑R，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；荧光探针Ph‑probe，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；2)用于扩增Tq‑nor‑1基因的引物和探针：上游引物Tq‑nor1‑F，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；下游引物Tq‑nor1‑R，核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；荧光探针Tq‑probe，核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；3)通用型探针qPCR预混液、DNA聚合酶、MgCl2、dNTPs、H2O。