[发明专利]一种胶原蛋白提取方法有效
| 申请号: | 201811465406.1 | 申请日: | 2018-12-03 |
| 公开(公告)号: | CN109207545B | 公开(公告)日: | 2020-08-28 |
| 发明(设计)人: | 郭文弘;何拥军;李巧美 | 申请(专利权)人: | 杭州蓝朗生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/14 |
| 代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 朱海江 |
| 地址: | 311199 浙江省杭州市余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | 本发明公开一种胶原蛋白提取方法,包括:①牛跟腱解冻,去血水、表面异物和筋膜,用溶液进行一次预处理;②步骤一处理的牛跟腱去脂肪膜,用溶液进行二次预处理;③步骤二处理完的牛跟腱冷冻后切片,用溶液进行前处理;④将前处理完的牛跟腱切片持续酶解,离心取上清制备胶原粗提液;⑤调节胶原粗提液pH,加入中性盐盐析,离心获得胶原蛋白沉淀;⑥加入磷酸盐缓冲液溶解上述沉淀,获得特定浓度的胶原蛋白。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 胶原 蛋白 提取 方法 | ||
【主权项】:
1.一种胶原蛋白提取方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,牛跟腱用纯化水解冻,去血水和表面异物,用手术剪去表面筋膜,用山梨酸钾溶液超声波清洗,滤水;通过一组预处理溶液Ⅰ搅拌处理后,用山梨酸钾溶液搅拌清洗,滤干;步骤二,将步骤一处理完的牛跟腱用纯化水浸泡,用手术剪去脂肪膜;通过一组预处理溶液Ⅱ浸泡处理后,用纯化水搅拌清洗,滤干;步骤三,将步骤二处理完的牛跟腱冷冻后进行切片,并用注射用水搅拌清洗,通过一组前处理溶液浸泡处理后,用注射用水搅拌清洗,滤干;步骤四,将步骤三处理完的牛跟腱切片持续酶解,离心取上清为胶原粗提液;步骤五,将胶原粗提液的pH调至6.5‑8.0,加入中性盐并搅拌形成盐析液,并在层析冰柜中放置12‑24h,离心盐析液获得胶原蛋白沉淀;步骤六,重复步骤五三次,通过磷酸盐缓冲液溶解胶原蛋白沉淀,获得特定浓度的胶原蛋白。
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