[发明专利]一种培养产物与基质完全分离的牛樟芝培养方法

摘要

本发明提供了一种培养产物与基质完全分离的牛樟芝培养方法，其选用谷物与牛樟树木屑混合作为培养基质，将不同谷物混匀后置于下层，少量牛樟树木屑铺于其上，接种时在培养基中间打一个圆柱体槽，将菌种块接入其中。培养完成后，培养基质表面形成了一层致密且有一定厚度的菌丝层，该菌丝层可轻易剥离，同时在圆柱体槽内形成一个类似于菌柄的菌丝体，将其上半部分取样，剩余菌丝体还可继续生长。利用此法，本发明不仅解决了固体培养法培养产物较难与基质完全分离的问题，还可除去培养产物中混有的木屑并提升其产量及三萜类成分含量，为牛樟芝固态发酵培养方面的实践提供了参考帮助，同时也为后续大规模发酵培养提供了基础，其成本低廉、操作简易。

主权项

1.一种培养产物与基质完全分离的牛樟芝培养方法，其特征在于：主要包括以下步骤：（1）活化接种原料：取4℃保存的牛樟芝菌种于PDA平板培养基上活化培养15‑30d后在靠近菌丝层边缘处打孔得到菌丝块用于接种；（2）制备固态发酵培养基：称取一定量的谷物原料及牛樟树木屑放于培养瓶中，谷物原料混匀后置于培养瓶下层，牛樟树木屑平铺于其上；另将葡萄糖、KH2PO4、MgSO4·7H2O溶于一定量的蒸馏水形成含有葡萄糖与无机盐的溶液，随后将该溶液倒入培养瓶中浸泡固体物料，使培养基的最终含水量为50%‑70%，浸泡时间为2h，然后放入高压灭菌锅中灭菌，灭菌温度为121℃，时间为30min；（3）打孔接种：用玻璃棒在固体培养基中心位置打一个2cm左右深的圆柱形槽，将原料菌丝块含有菌丝的一面贴着培养基质接种在圆柱形槽孔内，并置于恒温培养箱中28℃暗培养；（4）无菌超净台取样：培养一定时间后，在基质表面形成厚度为3‑5cm左右可轻松剥离的致密菌丝层，在无菌超净台中取样，培养基中剩余的菌丝体还可继续生长。