[发明专利]一种培养产物与基质完全分离的牛樟芝培养方法

权利要求书

1.一种培养产物与基质完全分离的牛樟芝培养方法，其特征在于：主要包括以下步骤：

（1）活化接种原料：取4℃保存的牛樟芝菌种于PDA平板培养基上活化培养20d后在靠近菌丝层边缘0.4cm处打孔得到菌丝块用于接种；

（2）制备固态发酵培养基：称取一定量的谷物原料及牛樟树木屑放于培养瓶中，谷物原料混匀后置于培养瓶下层，牛樟树木屑平铺于其上；另将葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O溶于一定量的蒸馏水形成含有葡萄糖与无机盐的溶液，随后将该溶液倒入培养瓶中浸泡固体物料，使培养基的最终含水量为50%-70%，浸泡时间为2h，然后放入高压灭菌锅中灭菌，灭菌温度为121℃，时间为30min；

（3）打孔接种：用玻璃棒在固体培养基中心位置打一个2cm深的圆柱形槽，将原料菌丝块含有菌丝的一面贴着培养基质接种在圆柱形槽孔内，并置于恒温培养箱中28℃暗培养；

（4）无菌超净台取样：培养一定时间后，在基质表面形成厚度为3-5cm可轻松剥离的致密菌丝层，在无菌超净台中取样，培养基中剩余的菌丝体还可继续生长；

所述的牛樟树木屑的处理方法为置于室外暴晒后用高压灭菌锅灭菌，灭菌温度为121℃，时间为2h，灭菌后将其放入烘箱中80℃烘干；

所述的谷物原料为大米50g、麸皮2.5g，将干料混匀后装入培养瓶中，培养瓶体积为450mL；

所述的牛樟树木屑是将牛樟树木材粉碎成0.5cm的片状木屑，称取烘干的牛樟树木屑1-5g平铺于谷物基质表面；

所述含有葡萄糖与无机盐的溶液中，葡萄糖为5g，KH₂PO₄为0.5g，MgSO₄·7H₂O为 0.5g。