[发明专利]一种利用纤维素酶-超声波协同提取黑木耳黑色素的方法

摘要

本发明公开了一种利用纤维素酶‑超声波协同提取黑木耳黑色素的方法，其最优条件为：酶添加量12mg，酶解温度40℃，酶解pH5.0，酶解时间120min，NaOH浓度1.27mol/L，料液比1:40 g/ml，超声功率300W，超声时间52min，超声温度60℃。在最优条件下，黑木耳黑色素提取得率可达到10.48%，相比于实验设置的未添加纤维素酶的超声波组黑色素提取得率提高了12.93%。抗氧化结果表明，采用纤维素酶‑超声波协同提取的黑色素相比于未加纤维素酶提取的黑色素清除ABTS、DPPH和羟基自由基的能力更强，为黑木耳黑色素的高效提取及其产品的应用开发奠定了基础。

主权项

1.一种利用纤维素酶‑超声波协同提取黑木耳黑色素的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将干燥的黑木耳子实体粉碎，过80目标准筛，备用；（2）精确称取黑木耳子实体粉末1.00g溶于一定pH和料液比1:20 g/ml的磷酸二氢钠‑柠檬酸缓冲溶液中，摇匀，加入一定量的纤维素酶，在适宜的温度下水浴反应一段时间，反应结束后，10000r/min离心5min，去除上清液，保留沉淀物；（3）在步骤（2）得到的沉淀物中，按一定料液比加入NaOH溶液，在一定的超声功率和超声温度下提取黑木而黑色素，提取结束后，于10000r/min离心5min，收集上清液，得黑色素提取液；（4）将黑色素提取液用HCl调节pH=1.5，80℃水浴10h，10000r/min离心3min，收集沉淀，将沉淀依次用蒸馏水、体积浓度95%乙醇、氯仿、乙酸乙酯、石油醚和体积浓度75%乙醇洗至溶液无色，6000r/min离心去除清洗溶剂，将沉淀用NaOH溶解，再用HCl调节pH=1.5，重新沉淀，离心收集沉淀，将沉淀用0.1M NaOH复溶，接着用0.1M HCl调节pH至中性，溶液流水透析48h，冷冻干燥，得干燥的黑木耳黑色素纯品。