[发明专利]一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法

摘要

一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法，属于微生物技术领域，由液体培养基的配制、固体培养基的配制、人参内生菌F1的培养及将人参主皂苷Rb1转化步骤完成，最终得到稀有人参皂苷CK。本发明采用人参内生菌转化生产稀有人参皂苷CK，内生菌生长周期短、生长迅速，易于培养而不受环境因素影响，适宜工业化生产。

主权项

1.一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法，其特征在于由以下步骤现实：⑴液体培养基的配制取成品V8汁饮料，经离心及过滤，取上清液200‑300mL，向其中加入2‑4g CaCO3，补足水至1000mL，得到液体培养基；⑵固体培养基的配制取成品V8汁饮料，经离心及过滤，取上清液200‑300mL，向其中加入2‑4g CaCO3及琼脂粉15‑20g，补足水至1000mL，得到固体培养基；⑶人参内生菌F1的培养取人参内生菌打成菌饼块，所述的人参内生菌为Fusarium oxysporum，将菌饼接种于固体培养基平板的中心，28℃培养，6‑9天后刮取平板上的菌丝移到100mL液体培养基的三角瓶中，28℃、130r/min往复摇床培养8‑10天，得到人参内生菌F1的培养液；⑷人参主皂苷Rb1转化方法向含有人参内生菌F1的培养液的三角瓶中加入已灭菌的玻璃珠，再将该三角瓶放在摇床中，200rpm室温振荡1‑2h，在无菌环境下过滤菌液，此菌液含有孢子；先将含有孢子的菌液按上述振荡条件下培养24h后，加入人参单体皂苷Rb1溶液，最后使人参内生菌F1菌液的孢子最终浓度为3‑5×106个/mL及人参皂苷Rb1底物浓度为0.25mg/mL，继续振荡培养5‑10天，得到稀有人参皂苷CK。