[发明专利]一种具有缓和抗凝血作用的贝类肝素及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种具有缓和抗凝血作用的贝类肝素及其制备方法和应用。所述制备方法为：原料处理；自溶；酶解：加入NaOH调节pH到7.8～8.2，加入胰蛋白酶，在32～42℃下酶解3.5～6.5 h，再加入HCl调节pH到6.8～7.2，加入木瓜蛋白酶，在62～68℃下酶解4.5～5.5 h，得到酶解液；灭酶、离心；浓缩、醇沉；复溶、脱蛋白；除盐；干燥。本发明首次以海蚌、象拔蚌、钝缀锦蛤、泥蚶、沙白贝为来源制备得到具有抗凝血作用的贝类肝素，该肝素来自海洋贝类，安全性高、作用缓和，不仅拓宽了肝素的来源，而且制备方法简单，产品质量稳定，在制备低副作用的肝素或其他具有缓和抗凝血功效的产品中具有良好的应用价值。

主权项

1.一种贝类肝素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1. 原料处理：将贝类洗净去壳后加水匀浆，得到匀浆液；S2. 自溶：将匀浆液于38～62℃水浴条件下自溶3～7 h；S3. 酶解：加入NaOH调节pH到7.8～8.2，加入胰蛋白酶，在32～42℃下酶解3.5～6.5 h，再加入HCl调节pH到6.8～7.2，加入木瓜蛋白酶，在62～68℃下酶解4.5～5.5 h，得到酶解液；S4. 灭酶、离心：将酶解液置于沸水中灭酶5～15 min，离心，取上清液；S5. 浓缩、醇沉：将上清液浓缩后加入乙醇，置于0.5～7.5℃下静置20～28 h，离心取沉淀；S6. 复溶、脱蛋白：交替用丙酮和乙醇洗涤沉淀2～3次，用水溶解沉淀，离心除去不溶物；于上清液中加入正丁醇‑氯仿混合液，充分振摇10~30 min，静置5～15 min，取上清液，重复操作3～4次；S7. 除盐：将脱蛋白后的提取液置于透析袋中透析48～96 h；S8. 干燥：将透析液进行冷冻干燥，即可得到所述的贝类肝素。