[发明专利]一种具有缓和抗凝血作用的贝类肝素及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种贝类肝素在制备具有缓和的抗凝血作用的产品中的应用，其特征在于，所述贝类肝素的制备方法包括如下步骤：

S1.原料处理：将贝类洗净去壳后加水匀浆，得到匀浆液；

S2.自溶：将匀浆液于38～62℃水浴条件下自溶3～7h；

S3.酶解：加入NaOH调节pH到7.8～8.2，加入胰蛋白酶，在32～42℃下酶解3.5～6.5h，再加入HCl调节pH到6.8～7.2，加入木瓜蛋白酶，在62～68℃下酶解4.5～5.5h，得到酶解液；

S4.灭酶、离心：将酶解液置于沸水中灭酶5～15min，离心，取上清液；

S5.浓缩、醇沉：将上清液浓缩后加入乙醇，置于0.5～7.5℃下静置20～28h，离心取沉淀；

S6.复溶、脱蛋白：交替用丙酮和乙醇洗涤沉淀2～3次，用水溶解沉淀，离心除去不溶物；于上清液中加入正丁醇-氯仿混合液，充分振摇10~30min，静置5～15min，取上清液，重复操作3～4次；

S7.除盐：将脱蛋白后的提取液置于透析袋中透析48～96h；

S8.干燥：将透析液进行冷冻干燥，即可得到所述的贝类肝素；

其中，所述贝类选自海蚌、钝缀锦蛤、象拔蚌、泥蚶或沙白贝。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S1所述匀浆的料液比为1：1.5～4.5。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S3所述胰蛋白酶的添加量为0.3%～0.7%；木瓜蛋白酶加酶量的添加量为0.3%～0.7%。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S5所述乙醇的加入量为浓缩液体积的0.3～0.6倍。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S6所述正丁醇-氯仿混合液中正丁醇与氯仿的体积比为1：4～5；所述正丁醇-氯仿混合液与上清液的体积比为1：4～5。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤S4所述离心的条件为：6000～8000rpm下离心10～20min。

7.根据权利1所述的应用，其特征在于，步骤S1中，还进行脱脂处理；所述脱脂处理为：将贝肉置于2～6℃的丙酮中浸泡20～28h，室温抽滤除去丙酮，用水冲洗3～5次。