[发明专利]一种静水压诱导虹鳟四倍体的制种方法

摘要

本发明公开了一种静水压诱导虹鳟四倍体的制种方法，在10.5℃水温条件下，在受精后的420～440分钟内，即胚胎发育的有效积温为4410～4620℃·min的范围内，在65～68.9Mpa静水压下进行压力休克处理，处理时间为5分钟，休克处理完毕后将受精卵移入至10～11℃的淡水中流水孵化。本发明的有益效果是操作简单、处理时间短、对受精卵的损伤较低，成活率高。

主权项

1.一种静水压诱导虹鳟四倍体的制种方法，其特征在于按照以下步骤进行：步骤1，对雌、雄虹鳟分别进行人工采卵、采精，将卵子采集到盛有单盐等渗液的塑料盆中，精液采到干燥的塑料盆中，使用雌、雄亲鱼数量比例为2:1；步骤2，人工授精，将精液倒入到盛有卵子的塑料盆中，用羽毛轻轻搅拌15～20秒使精卵混合均匀，并开始计时，作为受精的起点；步骤3，静置3～5分钟充分受精后，加少许清水多次洗卵，洗卵过程中尽可能去除过量的精液、未受精的死卵和血块等杂物；步骤4，对受精卵实施10.5℃冷流水吸水膨胀；步骤5，待受精后420～440分钟时，实施梯度升压法，即将受精卵倒入自制的塑料小桶内，提前一分钟放入盛有清水的加压室内，每加压10Mpa，暂停10秒，以减少压力对受精卵的损伤；步骤6，实施65～68.9Mpa的压力大小、持续时间5分钟，阻止受精卵第一次卵裂过程，诱导产生四倍体受精卵；步骤7，实施梯度降压，即每降压10Mpa，暂停10秒；步骤8，实施冷流水10.5℃孵化至孵化积温达220度日，胚胎出现黑色眼点，在此期间孵化室内进行遮光处理，保证受精卵在孵化阶段所需要的暗光条件，并减少对卵的震动，每周使用甲基蓝对受精卵进行杀菌处理；步骤9，实施冷流水10.5℃至孵化积温达600度日仔鱼孵化出膜；步骤10，在流水环境下对初浮仔鱼实施开食驯饲30天，育成四倍体稚鱼。