[发明专利]一种支持HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基

摘要

本发明公开了一种支持HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基，由氨基酸、维生素、无机盐及其它添加物组成，不含动物源组分，成分明确。本发明根据细胞体外生长的营养需求选择不同营养物质以替代动物血清所发挥的作用，并对不同营养物质的比例进行了合理调整。不需要补充血清也可以维持高密度悬浮培养HEK293细胞，使其能够维持正常的形态，分散不结团，同时保持正常的生长速度，利于外源基因的转染和表达，可以包装出较高滴度的慢病毒。

主权项

1.一种支持HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基，其特征在于：是由基础培养基包括的组分、血清替代组分和抗结团物质F68组成的，各物质浓度单位为mg/L：甘氨酸10～50；L‑丙氨酸2～10；L‑精氨酸盐酸盐50～200；L‑天冬酰胺5～20；L‑天冬氨酸5～20；L‑半胱氨酸盐酸盐10～50；L‑胱氨酸盐酸盐20～50；L‑谷氨酰胺300～500；L‑谷氨酸5～10；L‑组氨酸盐酸盐20～50；L‑异亮氨酸50～100；L‑亮氨酸50～100；L‑赖氨酸盐酸盐50～200；L‑蛋氨酸10～50；L‑苯丙氨酸20～50；L‑脯氨酸10～50；L‑丝氨酸20～50；L‑苏氨酸50～100；L‑色氨酸5～20；L‑酪氨酸50～100；L‑缬氨酸50～100；生物素0.0001～0.01；氯化胆碱5～10；D‑泛酸钙1～5；叶酸1～5；烟酰胺1～5；盐酸吡哆醇1～5；核黄素0.1～1；硫胺素盐酸盐1～5；维生素B12 0.1～1；肌醇10～20；无水氯化钙100～200；五水硫酸铜0.0001～0.01；九水硝酸铁0.01～0.1；七水硫酸亚铁0.1～1；无水氯化镁20～50；七水硫酸镁20～50；氯化钾300～500；碳酸氢钠2000～3000；氯化钠5000～8000；磷酸氢二钠50～100；一水磷酸二氢钠50～100；七水硫酸锌0.1～1；葡萄糖2000～3000；次嘌呤钠1～5；亚油酸0.1～0.5；硫辛酸0.1～1；酚红钠盐5～15；腐胺盐酸盐0.01～0.1；丙酮酸钠50～200；胸腺嘧啶0.1～0.5；HEPES2000～5000；抗坏血酸100～200；谷胱甘肽5～20；L‑多聚赖氨酸0.1～1；白蛋白1000～3000；胰岛素5～50；转铁蛋白5～50；氯化锰0.0001～0.01；偏钒酸铵0.0001～0.1；氯化镍0.0001～0.1；二水氯化亚锡0.0001～0.1；九水硅酸钠0.0001～0.1；四水钼酸铵0.0001～0.1；亚硒酸钠0.0001～0.1；抗结团物质F68：0.1%～0.5%；余量为水。