[发明专利]一种支持HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基

权利要求书

1.一种支持HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基，其特征在于：是由基础培养基包括的组分、血清替代组分和抗结团物质F68组成的，各物质浓度单位为mg/L：

甘氨酸10～50；

L-丙氨酸2～10；

L-精氨酸盐酸盐50～200；

L-天冬酰胺5～20；

L-天冬氨酸5～20；

L-半胱氨酸盐酸盐10～50；

L-胱氨酸盐酸盐20～50；

L-谷氨酰胺300～500；

L-谷氨酸5～10；

L-组氨酸盐酸盐20～50；

L-异亮氨酸50～100；

L-亮氨酸50～100；

L-赖氨酸盐酸盐50～200；

L-蛋氨酸10～50；

L-苯丙氨酸20～50；

L-脯氨酸10～50；

L-丝氨酸20～50；

L-苏氨酸50～100；

L-色氨酸5～20；

L-酪氨酸50～100；

L-缬氨酸50～100；

生物素0.0001～0.01；

氯化胆碱5～10；

D-泛酸钙1～5；

叶酸1～5；

烟酰胺1～5；

盐酸吡哆醇1～5；

核黄素0.1～1；

硫胺素盐酸盐1～5；

维生素B12 0.1～1；

肌醇10～20；

无水氯化钙100～200；

五水硫酸铜0.0001～0.01；

九水硝酸铁0.01～0.1；

七水硫酸亚铁0.1～1；

无水氯化镁20～50；

七水硫酸镁20～50；

氯化钾300～500；

碳酸氢钠2000～3000；

氯化钠5000～8000；

磷酸氢二钠50～100；

一水磷酸二氢钠50～100；

七水硫酸锌0.1～1；

葡萄糖2000～3000；

次嘌呤钠1～5；

亚油酸0.1～0.5；

硫辛酸0.1～1；

酚红钠盐5～15；

腐胺盐酸盐0.01～0.1；

丙酮酸钠50～200；

胸腺嘧啶0.1～0.5；

HEPES2000～5000；

抗坏血酸100～200；

谷胱甘肽5～20；

L-多聚赖氨酸0.1～1；

白蛋白1000～3000；

胰岛素5～50；

转铁蛋白5～50；

氯化锰0.0001～0.01；

偏钒酸铵0.0001～0.1；

氯化镍0.0001～0.1；

二水氯化亚锡0.0001～0.1；

九水硅酸钠0.0001～0.1；

四水钼酸铵0.0001～0.1；

亚硒酸钠0.0001～0.1；

抗结团物质F68：0.1%～0.5%；

余量为水。

2.如权利要求1所述用于HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基，其特征在于：培养基中包括抗结团物质F68，用量为0.3%。

3.如权利要求1所述用于HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基，其特征在于：通过Plackett-Burman实验筛选培养基组分中影响外源基因导入的物质，各浓度单位为mg/L：

亚油酸0.5；

腐胺盐酸盐0.1；

抗坏血酸100；

谷胱甘肽5；

白蛋白1000；

胰岛素5；

转铁蛋白50；

亚硒酸钠0.001。

4.权利要求1～3中任一项所述的用于HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基的制备方法，其特征在于：取上述除水外的组分，根据其各自溶解特性分类溶解，然后混合，加入水使各组分终浓度如上所述，调节pH 值至6.9～7.2，滤膜过滤除菌（0.22μm滤膜过滤）即得，分装。

5.如权利要求1～3所述用于HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基，其特征在于：培养基中细胞分散、不结团，利于细胞增殖、外源基因的导入和表达。

6.如权利要求1～3所述用于HEK293细胞悬浮培养的无血清培养基在慢病毒的包装中的应用。