[发明专利]一种简易的斑点杂交加样方法在审
| 申请号： | 201811311187.1 | 申请日： | 2018-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN109504742A | 公开（公告）日： | 2019-03-22 |
| 发明（设计）人： | 曹祖兵;王怡青;童旭;张丹丹;宁伟;齐昕;许腾腾;高迪;张运海 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6834 | 分类号： | C12Q1/6834 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 沈尚林 |
| 地址： | 230001 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种简易的斑点杂交加样方法，包括如下步骤：猪耳缘成纤维细胞的培养；细胞RNA的提取、浓度的测定以及调整；添加样品：预热金属浴至85℃，并将硝酸纤维素膜裁剪至所需要的合适大小；通过美纹纸将硝酸纤维素膜固定于层板上；在硝酸纤维素膜上于85℃烘烤下进行加样；加样后用重物压住层板，以使硝酸纤维素膜和金属浴紧密接触；进行斑点杂交；分析结果，比较灰度值。本发明整合利用了实验室里现有的资源，仅仅利用了盛装白枪头的层板和恒温金属浴，节省了很多耗材，而且省下了安装多管吸印仪耗费的时间和人力，还对加样操作进行了简化，对于技术优化具有重大意义。 | ||
| 搜索关键词： | 加样 硝酸纤维素膜 斑点杂交 金属浴 简易 成纤维细胞 技术优化 预热金属 重大意义 重物 细胞RNA 美纹纸 烘烤 裁剪 多管 耗材 灰度 枪头 压住 整合 猪耳 盛装 | ||
【主权项】：
1.一种简易的斑点杂交加样方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)猪耳缘成纤维细胞的培养；(2)细胞RNA的提取、浓度的测定以及调整；(3)添加样品：预热金属浴至85℃，并将硝酸纤维素膜裁剪至所需要的合适大小；通过美纹纸将硝酸纤维素膜固定于层板上；在硝酸纤维素膜上于85℃烘烤下进行加样；加样后用重物压住层板，以使硝酸纤维素膜和金属浴紧密接触；(4)进行斑点杂交；(5)分析结果，比较灰度值。
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