[发明专利]一种L-谷氨酸氧化酶纯化方法有效
申请号: | 201811306399.0 | 申请日: | 2018-11-05 |
公开(公告)号: | CN109321539B | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 董维亮;陈建豪;周杰;徐宁;姜岷 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 徐蓓;尹妍 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种L‑谷氨酸氧化酶纯化方法。包括:通过一步克隆的方法在载体质粒的多克隆位点插入蛋白标签ChiBD‑AB;在蛋白标签后融合目的蛋白LGOX基因;将连接蛋白标签ChiBD‑AB和目的蛋白LGOX基因的质粒导入宿主菌株表达,获取粗酶液;在粗酶液中加入几丁质作为吸附剂,之后洗脱,获取纯化酶液。本发明所使用的蛋白纯化标签ChiBD‑AB对几丁质具有特异性吸附能力,可从源头上杜绝杂蛋白的混入;使用试剂成本低,蛋白纯化方法操作简便,可适应大规模应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 谷氨酸 氧化酶 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1.一种L‑谷氨酸氧化酶纯化方法,其特征在于,包括:通过一步克隆的方法在载体质粒的多克隆位点插入蛋白标签ChiBD‑AB;在蛋白标签后融合目的蛋白LGOX基因;将连接蛋白标签ChiBD‑AB和目的蛋白LGOX基因的质粒导入宿主菌株表达,获取粗酶液;在粗酶液中加入几丁质作为吸附剂,之后洗脱,获取纯化酶液;其中,所述蛋白标签ChiBD‑AB的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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