[发明专利]一种L-谷氨酸氧化酶纯化方法有效

专利信息
申请号: 201811306399.0 申请日: 2018-11-05
公开(公告)号: CN109321539B 公开(公告)日: 2022-05-06
发明(设计)人: 董维亮;陈建豪;周杰;徐宁;姜岷 申请(专利权)人: 南京工业大学
主分类号: C12N9/06 分类号: C12N9/06
代理公司: 江苏致邦律师事务所 32230 代理人: 徐蓓;尹妍
地址: 211816 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种L‑谷氨酸氧化酶纯化方法。包括:通过一步克隆的方法在载体质粒的多克隆位点插入蛋白标签ChiBD‑AB;在蛋白标签后融合目的蛋白LGOX基因;将连接蛋白标签ChiBD‑AB和目的蛋白LGOX基因的质粒导入宿主菌株表达,获取粗酶液;在粗酶液中加入几丁质作为吸附剂,之后洗脱,获取纯化酶液。本发明所使用的蛋白纯化标签ChiBD‑AB对几丁质具有特异性吸附能力,可从源头上杜绝杂蛋白的混入;使用试剂成本低,蛋白纯化方法操作简便,可适应大规模应用。
搜索关键词: 一种 谷氨酸 氧化酶 纯化 方法
【主权项】:
1.一种L‑谷氨酸氧化酶纯化方法,其特征在于,包括:通过一步克隆的方法在载体质粒的多克隆位点插入蛋白标签ChiBD‑AB;在蛋白标签后融合目的蛋白LGOX基因;将连接蛋白标签ChiBD‑AB和目的蛋白LGOX基因的质粒导入宿主菌株表达,获取粗酶液;在粗酶液中加入几丁质作为吸附剂,之后洗脱,获取纯化酶液;其中,所述蛋白标签ChiBD‑AB的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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