[发明专利]一种细胞水平蛋白高通量检测方法在审
| 申请号： | 201811294884.0 | 申请日： | 2018-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN109444425A | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 施奇惠;邓宇亮;王春英 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 徐迅;马莉华 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种细胞水平蛋白高通量检测方法。具体地，本发明的方法包括以下步骤：(a)对外周血中的细胞进行富集得到富集的细胞；(b)将富集的细胞、偶联有寡核苷酸的待检蛋白抗体、细胞鉴定标志物进行孵育；(c)将孵育后的细胞加载到微孔芯片上；(d)对细胞进行分选，获得带有细胞鉴定标志物的目的细胞；(e)对抗体上偶联的寡核苷酸进行扩增，从而得到扩增产物；(f)对扩增产物进行测序；(g)对测序结果进行分析，从而获得单细胞水平蛋白高通量的测序结果。本发明的细胞单细胞水平蛋白检测方法灵敏度高、特异性好、通量高，可以准确地检测到痕量蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 测序 富集 单细胞水平 高通量检测 蛋白 寡核苷酸 扩增产物 细胞鉴定 细胞水平 标志物 孵育 偶联 蛋白检测 蛋白抗体 痕量蛋白 高通量 灵敏度 分选 加载 扩增 通量 微孔 芯片 对抗 检测 分析 | ||
【主权项】：
1.一种细胞水平蛋白高通量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)对外周血中的细胞进行富集，从而得到富集的细胞；(b)将步骤(a)中富集的细胞、偶联有寡核苷酸的待检蛋白抗体、细胞鉴定标志物进行孵育；(c)将步骤(b)中孵育后的细胞加载到微孔芯片上，从而使得所述微孔芯片上每个孔中有不多于一个细胞；(d)对所述细胞进行分选，获得带有细胞鉴定标志物的目的细胞；(e)对抗体上偶联的寡核苷酸进行扩增，从而得到扩增产物；(f)对步骤(e)的扩增产物进行测序；(g)对测序结果进行分析，从而获得单细胞水平蛋白高通量的测序结果。
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