[发明专利]对小鼠耳蜗神经元和毛细胞进行病理分析的体视学方法

摘要

本发明公开了一种对小鼠耳蜗神经元和毛细胞进行病理分析的体视学方法，包括如下步骤：对小鼠耳蜗组织进行切片，并对切片做化学成分特异染色；在每一张切片上相同部位获取照片，经显微摄像系统输入计算机；依照体视框的计数原则计数神经元的和毛细胞的数目；用体视学软件对耳蜗神经元和毛细胞损伤丢失和所处频率位置进行定量分析，采用体视学方法计数，达到小鼠耳蜗神经元和毛细胞数目。本发明借助计算机及数据处理系统和显微镜及显微成像系统，将二维平面经过成像及通过计算机分析处理得到三维形态，更准确的对小鼠耳蜗神经元和毛细胞进行定量和形态结构分析，确保实验结果能真实反映小鼠耳蜗神经元和毛细胞数目。

主权项

1.一种对小鼠耳蜗神经元和毛细胞进行病理分析的体视学方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取材：收集小鼠耳蜗组织，对小鼠耳蜗组织进行切片，切取成若干连续切片，并对切片做化学成分特异染色；(2)图像拍摄：每张切片在40倍物镜下的病理区域随机捕获3～5视野，在再100倍物镜下清晰聚焦后等距随机选择视野拍照，在每一张切片上相同部位获取照片，经显微摄像系统输入计算机，相邻的两个组织切片构成一个体视框，前一张作为对照平面，后一张作为测试平面，两者之间高度为8μm；(3)神经元数目和毛细胞数目计算：在对照平面和测试平面一个视野的固定位置叠放无偏计数框，依照体视框的计数原则计数神经元的和毛细胞的数目；(4)定量分析：用体视学软件对耳蜗神经元和毛细胞损伤丢失和所处频率位置进行定量分析，采用体视学方法计数，达到小鼠耳蜗神经元和毛细胞数目。