[发明专利]一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体及其应用有效
| 申请号： | 201811019561.0 | 申请日： | 2018-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN109337921B | 公开（公告）日： | 2021-07-20 |
| 发明（设计）人： | 李爽;察亚平;卓敏;朱晁谊 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;C12N15/90;C12N1/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 崔红丽 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体及其应用，属于生物技术领域。本发明的重组载体可以敲除酿酒酵母基因组中的SED1基因，得到的突变菌株在裂解酶Zymolyase作用下能使细胞快速裂解，释放细胞内物质至胞外。操作对象为酿酒酵母，具有广泛适用性。裂解过程中无需添加额外试剂，成本廉价。裂解时间短，2h可将细胞完全裂解，大大缩短了以往酿酒酵母细胞裂解的时间。操作简便，不需玻璃珠等繁琐步骤和配制复杂裂解液，只需一种简单的缓冲液，大大简化了实验流程。因此，可利用本发明的酿酒酵母裂解方法进行酶活检测、菌落PCR、质粒提取、蛋白鉴定和高通量筛选等，具有简易、快捷、廉价的优点，具有较广的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 酿酒 酵母 裂解 工程 重组 载体 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种构建酿酒酵母裂解工程菌的重组载体，其特征在于所述重组载体包括自5′到3′顺次连接Cas9表达框和gSED1表达框；所述的Cas9表达框核苷酸序列为Cas9表达框的任意序列；所述的gSED1表达框核苷酸序列为gSED1表达框的任意序列。
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