[发明专利]一种基于酶法偶联技术合成熊去氧胆酸和高手性纯度D-氨基酸的方法

摘要

本发明公开了一种基于酶法偶联技术合成熊去氧胆酸和高手性纯度D‑氨基酸的方法，该方法是将鹅去氧胆酸和α‑酮酸置于含7α‑HSDH和DAADH及NADP的溶液体系中进行酶催化反应，反应液采用超滤膜分离得到浓缩混合酶液，透析液经过调节pH进行结晶，过滤分离，得到7‑KLCA湿粉和滤液；滤液通过层析处理得到D‑氨基酸；7‑KLCA湿粉置于含葡萄糖、NADP、7β‑HSDH及GDH溶液体系中进行酶催化反应，反应液采用超滤膜分离，得到浓缩的混合酶液，透析液通过结晶、过滤分离，得到熊去氧胆酸。该方法可以同时获得UDCA和高手性纯度的D‑氨基酸，且酶利用率高，简化了合成步骤，成本降低，同时，反应过程不需加入金属还原试剂和有机溶剂，条件温和，环境友好，适于工业化生产。

主权项

1.一种基于酶法偶联技术合成熊去氧胆酸和高手性纯度D‑氨基酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将鹅去氧胆酸和α‑酮酸置于含7α‑HSDH和DAADH及NADP的溶液体系中进行酶催化反应，得到含7‑KLCA和D‑氨基酸的酶反应液；2)将含7‑KLCA和D‑氨基酸的酶反应液采用超滤膜分离，膜内为浓缩的混合酶液，膜外透析液经过调解pH至3.0～6.0进行结晶，过滤分离，得到7‑KLCA湿粉和滤液；3)所述滤液调节pH至5～9后，采用树脂进行层析处理，得到D‑氨基酸；4)所述7‑KLCA湿粉置于含葡萄糖、NADP、7β‑HSDH及GDH溶液体系中进行酶催化反应，得到含熊去氧胆酸的酶反应液；5)将含熊去氧胆酸的酶反应液采用超滤膜分离，膜内为浓缩的混合酶液，膜外透析液调解pH至3.0～6.0进行结晶，过滤分离，得到熊去氧胆酸。