[发明专利]一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒及其制备方法和使用方法

摘要

本发明公开了一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒及其制备方法和使用方法；所述试剂盒内包括荧光素标记的NGAL抗体溶液、碱性磷酸酶标记的NGAL抗体溶液、包被荧光素抗体的磁微粒悬浮液、NGAL校准品和发光底物溶液；本发明的试剂盒将免疫磁微粒技术和化学发光技术相结合，提供了一种接近均相的反应体系，让连接标记示踪物的NGAL抗体与连接桥连物的NGAL抗体先与待检测抗体反应，形成双抗原夹心结构的复合物；由于在形成双抗原夹心复合物的过程中，与标记抗原的都是小分子物质，其空间位阻远远小于磁性微球的空间位阻，能够促进抗原‑抗体结合反应充分进行，使得灵敏度、精密度、检测范围等检测性能大大提高。

主权项

1.一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒内包括荧光素标记的NGAL抗体溶液、碱性磷酸酶标记的NGAL抗体溶液、包被荧光素抗体的磁微粒悬浮液、NGAL校准品和发光底物溶液；所述荧光素标记的NGAL抗体溶液是将NGAL抗体加入到含有荧光素的pH为7‑9的Tris‑HCl缓冲液反应制备而成；所述碱性磷酸酶标记的NGAL抗体溶液由碱性磷酸酶与NGAL抗体通过交联剂辛二酸二琥珀酰亚胺酯连接而成；所述包被荧光素抗体的磁微粒悬浮液是将荧光素抗体与含有羧基活性基团的磁微粒混合反应而成；所述NGAL校准品是将NGAL抗原溶解到校准品缓冲溶液中配制而成，所述校准品缓冲溶液是通过在1L的新生牛血清中加入0.01g～0.05g的四环素和0.1g～0.5g的硫酸新霉素，完全溶解后经过0.22μm滤膜处理制备而成；所述发光底物溶液是将发光底物溶解于含有Tris、氯化钠(NaCl)、亚硫酸钠(Na2SO3)和Proclin‑300的底物中配制而成。