[发明专利]一种用于检测土壤中小麦全蚀病菌的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法有效
| 申请号: | 201810881426.0 | 申请日: | 2018-08-05 |
| 公开(公告)号: | CN108998552B | 公开(公告)日: | 2021-11-23 |
| 发明(设计)人: | 潘月敏;李常凤;沈鹏飞;乔玉强;李晓萌 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 尹明明 |
| 地址: | 230036 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种用于检测土壤中小麦全蚀病菌的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法,属于生物安全技术领域;所述的RPA引物基于小麦全蚀病菌β‑tubilin基因设计,RPA引物序列如SEQ ID No:1和2所示;所述的PRA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计,其序列大小为45bp‑54bp,其5’端用FAM标记,3’端用C3‑Spacer修饰,且在RPA探针的序列中间距5’端的33bp处进行THF修饰。本发明还提供含有所述的RPA引物和探针的试剂盒。本发明进一步提供基于所述的RPA引物和探针建立的RPA检测方法,首次将RPA技术应用到土壤中小麦全蚀病菌的分子检测,兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点,为小麦全蚀病的早期诊断、病害防治和农药减量使用提供新方法。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 土壤 小麦 病菌 rpa 引物 探针 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于检测土壤中小麦全蚀病菌的RPA引物和RPA探针,其特征在于:所述的RPA引物基于小麦全蚀病菌β‑tubilin基因设计,所述的RPA引物的上游引物如SEQ ID No:1所示,所述的RPA引物的下游引物如SEQ ID No:2所示;所述的PRA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计,所述的RPA探针的序列大小为45bp‑54bp,其5’端用FAM标记,3’端用C3‑Spacer修饰,且在RPA探针的序列中间距5’端的33bp处进行THF修饰。
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