[发明专利]一种定坤丹UPLC指纹图谱的构建方法及其应用

摘要

本发明公开了一种定坤丹UPLC指纹图谱的构建方法及其应用，属于中药技术领域。将供试品溶液和对照品溶液分别进行超高效液相色谱分析，色谱条件为以0.1%甲酸水为流动相A，以0.1%甲酸甲醇为流动相B，进行梯度洗脱，柱温30℃，进样量5μL，流速0.2mL/min，检测波长280nm，分析定坤丹指纹图谱信息共获得22个共有峰。采用国家药典委员会制定的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，对供试品溶液、对照品溶液的液相色谱进行数据匹配，即得标准指纹图谱。本发明建立的定坤丹指纹图谱能够较全面的反映定坤丹的物质信息，可准确有效评价和控制定坤丹的质量。

主权项

1.一种定坤丹UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：供试品溶液的制备取定坤丹切碎，称取1g，精密称定，加等量硅藻土，研匀，加入甲醇50ml，超声处理至少30min，滤过，旋转蒸发回收溶剂，残渣加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备精密称取没食子酸、5‑羟甲基糠醛、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、甘草苷、黄芩苷、藁本内酯对照品并溶于甲醇，0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为对照品溶液；（3）色谱条件色谱柱：Water Acquity UPLC HSS T3，1.8μm；流动相以0.1%甲酸水为流动相A，以0.1%甲酸甲醇为流动相B，进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为：0min时，流动相A所占的体积比为98%，流动相B所占的体积比为2%；5min时，流动相A 所占的体积比为93%，流动相B所占的体积比为7%；16min时，流动相A所占的体积比为56%，流动相B所占的体积比为44%；17.5min时，流动相A所占的体积比为56%，流动相B所占的体积比为44%；38min时，流动相A所占的体积比为15%，流动相B所占的体积比为85%；41min时，流动相A所占的体积比为5%，流动相B所占的体积比为95%；45min时，流动相A所占的体积比为98%，流动相B所占的体积比为2%；柱温：30℃；进样量：5μL；流速：0.2mL/min；紫外检测波长：280nm；（4）分别精密吸取步骤（1）制备的供试品溶液和步骤（2）制备的对照品溶液5μL注入超高效液相色谱仪中按照步骤（3）的色谱条件进行测定，分别得到供试品和对照品UPLC图谱；（5）采用国家药典委员会制定的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，对供试品溶液和对照品溶液的UPLC图谱进行数据匹配，得到标准指纹图谱。