[发明专利]检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法有效

专利信息
申请号: 201810777431.7 申请日: 2018-07-16
公开(公告)号: CN108896506B 公开(公告)日: 2020-10-27
发明(设计)人: 逯一中;倪朋娟 申请(专利权)人: 济南大学
主分类号: G01N21/33 分类号: G01N21/33
代理公司: 上海科律专利代理事务所(特殊普通合伙) 31290 代理人: 金碎平
地址: 250022 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明提供了一种检测碱性磷酸酶活性的方法,其包括如下步骤:A1:将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的碱性磷酸酶,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外‑可见吸收光谱的测量,得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程;A2:将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外‑可见吸收光谱的测量,得到ΔA,将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程,计算出待测碱性磷酸酶的活性。本发明具有如下的有益效果:1、本发明所利用的CeO2纳米粒子在水溶液中分散较好;2、本发明所提出方法检测时间短。
搜索关键词: 检测 碱性磷酸酶 活性 以及 抑制剂 浓度 方法
【主权项】:
1.一种检测碱性磷酸酶活性的方法,其特征在于,包括如下步骤:A1:将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的碱性磷酸酶,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外‑可见吸收光谱的测量,得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程;A2:将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外‑可见吸收光谱的测量,得到ΔA,将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程,计算出待测碱性磷酸酶的活性。
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