[发明专利]乙肝病毒核酸的快速扩增方法有效
申请号: | 201810728131.X | 申请日: | 2018-07-05 |
公开(公告)号: | CN108913811B | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
发明(设计)人: | 范旭;戴立忠 | 申请(专利权)人: | 圣湘生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 黄晓庆 |
地址: | 410205 湖南省长*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明涉及一种乙肝病毒核酸的快速扩增方法,包括以下步骤:将含有乙肝病毒的样品与核酸释放剂混合后加入PCR预混液得到反应液,所述核酸释放剂包括莎梵婷、氯化钾、十二烷基磺酸钠和乙醇,所述PCR预混液包括脱氧核糖核苷三磷酸、如SEQ No.1序列所示的上游引物、如SEQ No.2序列所示的下游引物、DNA聚合酶和扩增缓冲液;将所述反应液置于PCR反应管中使所述反应液呈厚度小于等于0.1mm的薄膜状;将所述PCR反应管置于PCR扩增仪中按照以下反应条件进行PCR扩增:90~100℃预变性10s~600s,90~100℃变性0~1s,50~65℃退火延伸0~1s。本发明在确保扩增的准确性和有效性的前提下,每一个循环所需要的时间都显著地缩短了,实现了快速简单地扩增乙肝病毒核酸的目的。 | ||
搜索关键词: | 乙肝病毒 核酸 快速 扩增 方法 | ||
【主权项】:
1.一种乙肝病毒核酸的快速扩增方法,其特征在于,包括以下步骤:将含有乙肝病毒的样品与核酸释放剂混合后加入PCR预混液得到反应液,所述核酸释放剂包括莎梵婷、氯化钾、十二烷基磺酸钠和乙醇,所述PCR预混液包括脱氧核糖核苷三磷酸、如SEQ No.1序列所示的上游引物、如SEQ No.2序列所示的下游引物、DNA聚合酶和扩增缓冲液;将所述反应液置于PCR反应管中使所述反应液呈厚度小于等于0.1mm的薄膜状;将所述PCR反应管置于PCR扩增仪中设定以下反应条件进行PCR扩增:预变性温度设为90~100℃,预变性时间设为10s~600s,变性温度设为90~100℃,变性时间设为0~1s,退火延伸温度设为50~65℃,退火延伸时间设为0~1s。
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