[发明专利]一步纯化固定化ɑ-氨基酸脂酰基转移酶的方法有效
| 申请号： | 201810672940.3 | 申请日： | 2018-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN108728424B | 公开（公告）日： | 2021-09-14 |
| 发明（设计）人： | 李晨辉;刘超;王红权;李燕飞;康丽娟;马福民;姜召红;梁云科;李晓微 | 申请（专利权）人： | 河北善泉生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/70;C12N11/16 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 柳萌 |
| 地址： | 050035 河北省石家庄市高*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明涉及酶固定化技术领域，具体公开一种一步纯化固定化ɑ‑氨基酸脂酰基转移酶的方法，通过对ɑ‑氨基酸脂酰基转移酶进行醛基化标记，并在宿主细胞内对ɑ‑氨基酸脂酰基转移酶和甲酰甘氨酸合成酶进行同步诱导，得到高表达量的菌株，将菌体破碎取上清，与氨基载体混合后即可一步实现ɑ‑氨基酸脂酰基转移酶的固定化，无需额外的纯化步骤。本发明方法节省了操作步骤，并保证了目标蛋白的表达，且用普通的氨基载体即可固定化，适于工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一步 纯化 固定 氨基酸 脂酰基 转移酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种一步纯化固定化ɑ‑氨基酸脂酰基转移酶的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将ɑ‑氨基酸酯酰基转移酶基因与醛基化标签基因融合；(2)将步骤(1)融合后的基因和甲酰甘氨酸合成酶基因分别连接到原核表达载体上；(3)将构建好的载体转入宿主细胞，对两种酶进行同步诱导表达；(4)离心收集诱导完的菌体，破碎后离心收集上清，与氨基载体混合进行固定化。
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