[发明专利]一种建立水稻悬浮细胞系的方法及其制备工艺在审
申请号: | 201810651748.6 | 申请日: | 2018-06-22 |
公开(公告)号: | CN108782248A | 公开(公告)日: | 2018-11-13 |
发明(设计)人: | 龙起樟;万建林;黄永兰;唐秀英;王会民;芦明 | 申请(专利权)人: | 江西省超级水稻研究发展中心 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人: | 龙涛 |
地址: | 330200 江西*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 本发明公开了一种建立水稻悬浮细胞系的方法,包括以下步骤:(1)接种用胚性愈伤组织的获得;(2)将获得的水稻胚性愈伤组织接种于培养基中,在摇床中振荡培养;(3)将培养物中的大颗粒愈伤筛除,收集悬浮液,离心,收集沉淀物;(4)添加新鲜培养基,将收集的沉淀物悬浮培养,继代培养多次后,直至培养基底部小颗粒细胞团大量产生,同时培养液变得较澄清;(5)吸取培养液中的小颗粒进行继代培养,添加培养基,继代2次后,转入不同培养基中继代,吸取其中小颗粒继代培养数天,即获得水稻悬浮细胞系。本发明提供了一种建立水稻悬浮细胞系的方法,可以缩短悬浮细胞培养进程,提高悬浮细胞系的胚性和减少无性系变异。 | ||
搜索关键词: | 水稻悬浮细胞系 培养基 继代培养 小颗粒 培养液 接种 水稻胚性愈伤组织 胚性愈伤组织 悬浮细胞培养 无性系变异 新鲜培养基 悬浮细胞系 悬浮培养 振荡培养 制备工艺 大颗粒 培养物 细胞团 悬浮液 继代 胚性 摇床 愈伤 中继 澄清 转入 进程 | ||
【主权项】:
1.一种建立水稻悬浮细胞系的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)接种用胚性愈伤组织的获得;(2)将获得的水稻胚性愈伤组织接种于培养基中,在摇床中振荡培养;(3)将培养物中的大颗粒愈伤筛除,收集悬浮液,离心,收集沉淀物;(4)添加新鲜培养基,将收集的沉淀物悬浮培养,悬浮培养过程中间隔不断添加新鲜培养基,继代培养多次后,直至培养基底部小颗粒细胞团大量产生,同时培养液变得较澄清;(5)吸取培养液中的小颗粒进行继代培养,添加培养基,继续悬浮培养,继代2次后,转入不同培养基中继代,吸取其中小颗粒继代培养数次,即获得水稻悬浮细胞系。
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