[发明专利]一种从石油污染土壤富集分离优势固氮菌的方法有效
| 申请号： | 201810646710.X | 申请日： | 2018-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108707571B | 公开（公告）日： | 2021-02-09 |
| 发明（设计）人： | 王磊;李唯;陈琳;张心昱;郑国砥;张雅茜 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/065 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从石油污染土壤富集分离优势固氮菌的方法，属于微生物分离培养技术领域。本发明方法包括以下步骤：(1)采集石油污染土壤，加葡萄糖诱导后，乙炔还原法测定样品固氮酶活性，选择固氮活性高或固氮菌量多的样品，制备悬浮液进行梯度稀释；(2)制备无氮固体培养基，在培养基融化状态分别加入不同稀释度的悬浮液，混匀后转移至厌氧管中制备薄层培养基，选用0‑2％氧浓度培养，若培养基表面或内部有菌落生长，则分离得到了石油污染土壤中富集的优势固氮菌。本发明利用碳氮比失衡及速效碳源的添加，激活并富集土著固氮菌，同时采用无氮培养基，0‑2％氧浓度培养，促进固氮酶的表达，从而获得石油土壤中优势固氮菌，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 石油 污染 土壤 富集 分离 优势 固氮菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种无氮固体培养基，其特征在于，其1L的配方为：葡萄糖20‑50g；K2HPO40.5‑1.0g；MgSO4·7H2O 0.1‑0.2g；三价铁柠檬酸盐0.02‑0.05g；NaMoO4·2H2O 0.001‑0.76g；琼脂粉8‑15g；加水至1L；pH 7.0。
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