[发明专利]一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法在审
| 申请号： | 201810631986.0 | 申请日： | 2018-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN109100335A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 徐革锋;黄天晴;谷伟;王炳谦;张玉勇 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/28;G01N1/30 |
| 代理公司： | 哈尔滨市文洋专利代理事务所(普通合伙) 23210 | 代理人： | 何强 |
| 地址： | 150070 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法，它涉及一种对鱼胚胎进行倍性鉴定的方法。本发明方法能够缩短倍性鉴定周期，避免养殖过程中外界因素导致的生产损失。鉴定方法：一、5～8℃条件下将鲑鳟鱼眼点期胚胎单独暂放，并保持胚胎空气交换不缺氧；二、制成胚胎细胞悬浊液；三、过滤，获得检测样本；四、将染色的已知鲑鳟鱼二倍体样本用倍性分析仪检测，并调整荧光信号值至100处设定为对照样本；将检测样本染色后用倍性分析仪检测，记录荧光信号值，通过机器自带的分析系统，将检测样本的峰值图均值与对照样本峰值图比较，确定检测样本的倍性大小。 | ||
| 搜索关键词： | 样本 倍性鉴定 鲑鳟鱼 胚胎 倍性 分析仪检测 检测 荧光信号 染色 活体 分析系统 空气交换 胚胎细胞 生产损失 外界因素 二倍体 悬浊液 鱼胚胎 眼点 自带 过滤 缺氧 养殖 记录 | ||
【主权项】：
1.一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、5～8℃条件下将鲑鳟鱼眼点期胚胎单独暂放，并保持胚胎空气交换不缺氧；二、将鲑鳟鱼眼点期胚胎用尖头镊子刺穿，释放出卵内的液态油脂，之后用镊子夹住胚胎在PBS缓冲液中搅动清洗掉多余油脂，随后置于培养皿的细胞核染液中，将卵皮及活体胚胎切碎、摇匀制成胚胎细胞悬浊液；三、用细胞核染液冲洗培养皿与步骤二胚胎细胞悬浊液混合，再用30μm孔径滤网对胚胎细胞混合悬浊液进行过滤；取滤液用30μm孔径滤网再过滤一次，获得检测样本；四、将染色的已知鲑鳟鱼二倍体样本用倍性分析仪检测，并调整荧光信号值至100处设定为对照样本；将检测样本染色后用倍性分析仪检测，记录荧光信号值，通过机器自带的分析系统，将检测样本的峰值图均值与对照样本峰值图比较，确定检测样本的倍性大小。
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