[发明专利]一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法

权利要求书

1.一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、5～8℃条件下将鲑鳟鱼眼点期胚胎单独暂放，并保持胚胎空气交换不缺氧；

二、将鲑鳟鱼眼点期胚胎用尖头镊子刺穿，释放出卵内的液态油脂，之后用镊子夹住胚胎在PBS缓冲液中搅动清洗掉多余油脂，随后置于培养皿的细胞核染液中，将卵皮及活体胚胎切碎、摇匀制成胚胎细胞悬浊液；

三、用细胞核染液冲洗培养皿与步骤二胚胎细胞悬浊液混合，再用30μm孔径滤网对胚胎细胞混合悬浊液进行过滤；取滤液用30μm孔径滤网再过滤一次，获得检测样本；

四、将染色的已知鲑鳟鱼二倍体样本用倍性分析仪检测，并调整荧光信号值至100处设定为对照样本；将检测样本染色后用倍性分析仪检测，记录荧光信号值，通过机器自带的分析系统，将检测样本的峰值图均值与对照样本峰值图比较，确定检测样本的倍性大小。

2.根据权利要求1所述的一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法，其特征在于步骤二培养皿中细胞核染液为300ml，其中200μl细胞核染液置于培养皿边缘处，其余100μl细胞核染液置于培养皿中央，活体胚胎放置于中央100μl细胞核染液中，切碎后倾斜培养皿将细胞核染液合并制成胚胎细胞悬浊液。

3.根据权利要求1所述的一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法，其特征在于检测样本暂时存放须避光。

4.根据权利要求1所述的一种对鲑鳟鱼胚胎活体进行倍性鉴定的方法，其特征在于细胞核染液为CyStain DNA 1 Step。