[发明专利]一种花生DNA快速提取的方法在审
| 申请号： | 201810549964.X | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN108410865A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 王娟;单世华;李春娟;闫彩霞;赵小波 | 申请（专利权）人： | 山东省花生研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京中北知识产权代理有限公司 11253 | 代理人： | 孙静静 |
| 地址： | 266000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及DNA提取方法技术领域，特别涉及一种花生DNA快速提取的方法。包括如下步骤：(1)花生叶片样品在液氮中研磨成粉末状；(2)向样品管中加入预热的CTAB缓冲液，颠倒混匀后，置于65℃水浴锅中～30min；(3)将样品管取出，加入等体积预冷的酚‑氯仿溶液，上下颠倒10min后离心；(4)取上清液，沿管壁缓慢加入‑20°预冷的异丙醇，接触面出现沉淀层；(5)弃去上清液，吸取沉淀层置于70％乙醇中洗涤，离心；(6)室温干燥DNA沉淀，加入适量TE溶液溶解DNA沉淀。本发明高效的提取花生叶片DNA，能够在短时间内快速提取，操作简单，纯度高，成本低。本发明改变了传统花生叶片DNA提取方式，具有进步性，为后续花生叶片DNA研究奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 花生叶片DNA 快速提取 沉淀层 样品管 预冷 颠倒 花生 花生叶片 氯仿溶液 取上清液 室温干燥 研磨 进步性 上清液 水浴锅 异丙醇 预热的 乙醇 管壁 混匀 液氮 洗涤 溶解 取出 研究 | ||
【主权项】：
1.一种花生DNA快速提取的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取花生叶片样品，在液氮中充分研磨，得到叶片粉末；(2)向叶片粉末的样品管中加入CTAB缓冲液，迅速颠倒混匀后，于65℃水浴锅中保温，保温时间20～40min，其中每间隔15min上下颠倒3～4次；(3)将样品管取出，加入适量4℃预冷的酚‑氯仿溶液，上下颠倒5‑10min，再离心，得到上清液；(4)取上清液，沿管壁缓慢加入适量‑20℃预冷的异丙醇，接触面出现沉淀层；(5)轻轻弃去上清，吸取沉淀层置于直接置于70％的乙醇中洗涤，离心，弃去液体，得到DNA沉淀；(6)室温下干燥DNA沉淀，加入适量TE溶液溶解沉淀的DNA。
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